酵母Trr2p蛋白的提取与分离(2)
时间:2017-04-26 22:26 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
本研究以安琪干酵母粉为材料，进行活化，初选、复选、显微镜检酵母和扩大培养，然后用超声波破碎酵母细胞，通过葡聚糖凝胶柱层析分离蛋白质，利用凝胶电泳进行初步鉴定。Trr2p蛋白的提取与分离为对其做进一步的研究提供了前提条件，为人类进一步了解硫氧还蛋白系统、探索生命的奥秘打下了坚实的基础。 1. 材料和方法 1.1 实验材料 本研究所用的菌株来自安琪干酵母粉，产自湖北宜昌安琪酵母有限公司。本研究所用试剂以及仪器均来自周口师范学院生命科学与农学学院生物化学实验室与分子生物学实验室。 1.2 培养基和缓冲液 初选（复选）选培养基：酵母膏5 g，蛋白胨10 g，琼脂粉10 g，葡萄糖10 g，加蒸馏水定容至500 mL。 扩大培养基（YPD培养基） ：10 g酵母膏，20 g蛋白胨，20 g 葡萄糖，补蒸馏水至1000 mL。 破壁缓冲液（0.1mol/L磷酸缓冲液） 洗脱液：0、1mol/L PH6.8 磷酸缓冲液 凝胶贮备液：丙烯酰胺（Acr）29.2g，亚甲基双丙烯酰胺（Bis）0.8g，加重蒸水至100ml，外包锡纸，4摄氏度冰箱保存 分离胶缓冲液：1.5 mol/L Tris-HCl，pH8.8。 浓缩胶缓冲液：0.5 mol/L Tris-HCl，pH6.8。 10%SDS室温保存 (责任编辑：qin) |