马铃薯遗传转化体系的优化及转基因植株的获得(2)
时间:2020-08-15 16:26 来源:毕业论文 作者:毕业论文 点击:次
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2 材料和方法源'自:优尔:"论-文'网www.youerw.com 2.1 植物材料与试剂 本实验以马铃薯栽培品种Desiree的无菌苗为植物材料，取苗龄3周的生长状态良好的无菌苗茎段为转化的受体材料。 实验所用卡那霉素(Kanamycine,Kan)购于荷兰Sigma公司,头孢霉素(Cefotaxime ,Cefo)购于Amresco公司,乙酰丁香酮(Acetosyringone ,AS)购于BBI公司,所用玉米素(ZT)、赤霉素(GA3)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和6-苄基嘌呤(6-BA)为中国医药集团上海化学试剂有限公司产品。其他试剂均为分析纯。 2.2 菌株与质粒 根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株EHA105，含植物表达载体pBIN19/glgB-SBD重组质粒(由本实验室构建)。pBIN19/glgB-SBD质粒上主要携带大肠杆菌淀粉分支酶基因（glgB-SBD）和选择标记基因卡那霉素（Kan）抗性基因nptⅡ。 2.3 主要仪器 低速离心机，水浴锅，剪刀，PCR仪，移液枪，干燥箱，电泳仪，凝胶成像系统等。 2.4 培养基 农杆菌菌液培养选用LB培养基，马铃薯遗传转化涉及的培养基 (责任编辑：qin) |