毕业论文移动版

1.1  叶绿素测定方法比较源'自:优尔:"论-文'网www.youerw.com

植物叶绿素含量的测定通常有分光光度计法、活体叶绿素仪法和光声光谱法三种方法。其中，分光光度计法应用最为广泛。由于所用的叶绿素提取溶剂不同，分光光度计法又分为多种测定方法。以下为常用的几种分光光度计法。

a、Arnon法：1949年经Arnon解释和推导以来，Arnon法就因不复杂易掌握而在国际上被广泛应用至今。根据Arnon法，叶绿素a，b及总含量（mgL-1）的计算方法为：

Ca=12.7A663-2.69A645

Cb=22.9A645-4.68A663

      C=Ca+Cb=20.2A645+8.02A663

但是，因为要在易于挥发的丙酮中研磨植物材料，且得到的提取液还要离心或过滤，这对于需要测定较多样品的实验就显得既繁琐又复杂，同时由于叶绿素在80%的丙酮溶液中易受光氧化破坏，常会获得偏低的测定值，在对大量样品进行测定时，则更容易造成误差。这就在一定程度上限制了这个方法的使用。

b、DMSO法：1979年Hiscox等报道了DMSO法[2]，用二甲基亚矾（DMSO）作为浸提液提取高等植物的叶绿素，省去繁琐和极费时间的研磨和离心的程序，大大简化了测定手续。实验还证明，叶绿素在DMSO溶液中比在丙酮溶液中具有更高的稳定性，这对于有大量样品需要测定的工作来说是十分有利的。但是由于DMSO法是在65℃高温下提取，叶绿素提取液与丙酮叶绿素提取液的吸收光谱存在一定的差异，用丙酮法公式计算叶绿素含量不适用。而且DMSO的气难闻并且在温度低于19℃时易结晶，致使该法的应用受到一定的限制。