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摘要：本研究首先构建了一个含有GASBD2基因的植物表达载体pBIN19/GASBD2，然后将该植物表达载体pBIN19/GASBD2通过电激转化法导入根瘤农杆菌EHA105中。最后通过根癌农杆菌介导的方法将pBIN19/GASBD2转入马铃薯Desiree中，并对转基因马铃薯植株进行PCR检测，最终获得了转基因马铃薯植株。68674

毕业论文关键词：GASBD2基因，植物表达载体，PCR检测，转基因马铃薯植株

Abstract: In this study, the plant expression vector pBIN19/GASBD2 containing GASBD2 gene was constructed and was then transferred into Agrobacterium EHA105 by electroporation. Finally, the pBIN19/GASBD2 vector was transferred into the potato Desiree by Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation. The results of PCR identification of transgenic potato plants indicated that the GASBD2 gene had been integrated into transgenic potato genome.

Key words: the GASBD2 gene, the plant expression vector, PCR identification, transgenic potato plants

目录

前言 - 3 -

1  材料与方法 - 3 -

1.1  材料 - 3 -

1.1.1  质粒与菌株 - 3 -

1.1.2　酶与试剂 - 3 -

1.1.3　植物材料 - 3 -

1.1.4  培养基 - 3 -

1.2  方法 - 4 -

1.2.1  植物表达载体pBIN19/GASBD2的构建 - 4 -

1.2.2  农杆菌的转化及鉴定 - 4 -

1.2.3  马铃薯的遗传转化 - 4 -

1.2.4  转化植株的PCR检测 - 5 -

2  结果与分析 - 5 -

2.1  植物表达载体的构建及农杆菌的转化 - 5 -

2.1.1  植物表达载体的构建 - 5 -

2.1.2  农杆菌的转化 - 6 -

2.1.3  马铃薯的遗传转化 - 6 -

2.2  转基因马铃薯植株的PCR分析 - 7 -

3  结论 - 9 -

参考文献 - 10 -

致 谢： - 11 -

前言

马铃薯（学名：Solanum tuberosum，英文：potato）又称山药蛋、地蛋、洋芋、芋头、土豆等，是一年生草本植物。马铃薯的人工栽培地最早可追溯到大约公元前8000年到5000年的秘鲁南部地区。在我国已有400多年的栽培历史，在我国陕南地区作为农作物被广泛种植。马铃薯是中国五大主食之一，其蛋白质含量比大豆还高，最接近动物蛋白。因其营养价值高、适应力强、产量大，所以成为全球第四大重要的粮食作物，仅次于水稻、小麦和玉米。论文网

马铃薯属于同源四倍体无性繁殖作物[1]，因为它具有高度杂合性，所以常导致自交不亲和及雄性不育，从而大大提高了用常规育种方法进行马铃薯改良的难度。由于常规育种方法需要的时间长、难度大，因此利用基因工程技术提高马铃薯产量和品质是一种非常有效的方法。

本研究以pBIN19/SBD2质粒为基础构建了一个植物表达载体pBIN19/GASBD2，然后采用优化后的遗传转化体系将植物表达载体pBIN19/GASBD2转化到马铃薯栽培品种Desiree的无菌苗中，并进行PCR检测。