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PPP1CB 基因可编码蛋白磷酸酶（PP1）的一个亚基，PP1是重要的丝-苏氨酸蛋白磷酸酶，拥有很多亚基，可以组成多种全酶，作用和蛋白激酶相反，主要使蛋白质脱磷酸[3]。根据丝氨酸－苏氨酸蛋白磷酸酶理化性质可把这些酶大致分成4类：PPP1，PPP2A，钙调磷酸酶（PPP2B）和Mg2+依赖型磷酸酶（PPP2C）。PPP1（PPP1C），PPP2A（PPP2AC）和 PPP2B的催化亚基属于一基因家族，拥40%相似的基因序列，没有与PPP2C结构相似的序列[4]。PPP1有3个亚型：PPP1α，PPP1β，PPP1γ（PPP1γ1 和 PPP1γ2)。在很多的生理活动中：如细胞周期[5]、细胞内的各种糖的代谢、肌肉的收缩等的调节中都起着重要的作用。而国内外对PPP1CB基因与肉质性状相关性的报道甚少。仅有研究表明[6]，梅山猪和大白猪的杂交后代中PPP1CB基因的表达水平存在差异，这种差异主要表现出与腰背最长肌的性状有相关性。另外，也有研究显示[7,8]，PPP1CB基因与中国西门塔尔牛的肉质性状具有一定的相关性。但关于湖羊P1CB基因的遗传多态性及其与生长性状的相关性未见报道，本研究探讨湖羊P1CB基因的遗传多态性及其与体尺性状的相关性，为湖羊的选种选育工作提供参考依据。

2 材料与方法文献综述

2.1 实验材料 

湖羊（Hu Sheep）：从江苏省徐州市铜山区黄集镇大郭庄机场采集湖羊的耳组织80份并采集了其体尺数据。湖羊耳朵组织置于75%乙醇，置于冰盒带回。放到实验室-80℃冰箱中保存用于以后的实验。

2.2实验试剂和溶液

　（1）湖羊耳组织基因组DNA提取液；

　（2）电泳检测DNA所用的缓冲液；

　（3）PCR-SSCP所用缓冲液。

2.3 实验方法

2.3.1 湖羊耳组织的采集和保存

通过选取80只湖羊，每只羊采取适量的耳组织，放在盛乙醇离心小管中，置于冰盒带回。放到实验室-80℃冰箱中保存用于以后的实验。

2.3.2 湖羊的体尺指标的采集

按照《家畜育种学实验指导》[9]中讲解的方法，实验人员使用皮尺，经准确的测量获得每只湖羊的体尺指标数据并对应记录好，带回做好归档。 

2.3.3 湖羊耳组织DNA的提取来*自-优=尔,论:文+网www.youerw.com

耳组织DNA的提取使用酚和氯仿按一定的比例进行抽提[10]。 

2.3.4 DNA浓度与纯度的检测及其纯化

每个提取完成的DNA都需要进行质量检测，主要是观察新提取的DNA的纯度，检测其是否能够用于接下来的实验。这个过程需要使用琼脂糖凝胶电泳，观察经过电泳后，DNA的电泳明亮条带是否清楚、是否存在拖尾现象。经过检测，提取的DNA的质量很差，不能用于后面的PCR-SSCP检测，所以需要对进行纯化。纯化DNA所需的材料主要是SanPrep柱式PCR试剂盒。

对纯化完成的DNA溶液进行琼脂糖凝胶电泳检测其纯度及浓度，并根据图像判断是否能够用于后续的实验。

2.3.5 PCR引物设计

此次实验所采用的PCR引物是根据GenBank中绵羊的PPP1CB基因序列（Accession No.：NC_019460.2）而设计的。根据基因序列中所显示的信息，一共设计了5对引物，并将这5对引物命名为：P1、P2、P3、P4和P5，这5对引物所对应的外显子分别为：外显子1、外显子2、外显子3、外显子5和外显子6。每一对引物都有其固定的条件