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2。4。3 测总多酚含量

本实验采用Folin-Ciocalteu 比色法测定总多酚的含量：

1。配制没食子酸标准溶液：由于多酚是一类混合物，其含量测定的标准物质通常为没食子酸、儿茶素、绿原酸等[19]，本实验采用没食子酸作为多酚测定的标准物质。

精确称量5。0mg的干燥没食子酸标准品，用无水乙醇定容至1mL，配成5mg/mL的标准品,转移至避光处。接着用移液枪采用逐半递减浓度的方法，依次稀释得到12组质量浓度为2。5mg/mL、1。25mg/mL、0。625mg/mL、0。3125mg/mL、0。1562mg/mL、0。0781mg/mL、0。0391mg/mL等一系列浓度梯度的标准品。

2。Folin-Ciocalteu 显色剂的配制：按郑仕宏等[20]的方法，在10mL的离心管内加入0。5g 钨酸钠、1。25g钼酸钠、3。5mL超纯水、0。5mL浓盐酸以及0。25mL浓磷酸，震荡，混合均匀，加热回流10h，再加入 0。75g 硫酸锂、0。25mL 蒸馏水、数滴溴水。然后打开开口继续沸腾约10min，保证溴水能够完全挥发，冷却后定容至10mL，过滤，滤液呈黄绿色，置于棕色试剂瓶中保存。使用时加入 1 倍体积的蒸馏水，使酸的浓度为 1mol/L，此液为应用液，置于冰箱中可以长期保存。

3。何首乌不同提取段试样的配制：精确称量何首乌二氯甲烷相提取物1mg，乙酸乙酯相提取物5mg，正丁醇相提取物5mg，水相提取物100μL，总浸膏2mg，加入无水乙醇定容至1mL，得何首乌不同提取段试样。