毕业论文移动版

1。2。2 预处理

将洗净的根尖浸入装有适量0。05%秋水仙素溶液的指形瓶中，室温下处理3～4小时。也可把根尖浸入小烧杯内的蒸馏水中，杯内放入少许冰块，置于0～4℃的冰箱内低温处理24 h左右。

1。2。3 固定

吸去预处理液，用去离子水清洗2次，每次10min。取出根尖，投入装有卡诺氏固定液（每次使用前现配）的指形瓶中，固定2～24h，取出水洗2次，每次10min。放入95%乙醇溶液中浸泡10min，再换入70%乙醇溶液，保存于4℃冰箱中备用。

1。2。4 水解（酸解） 

取出根尖材料，去离子水清洗2次，每次10min。将根尖材料纵向对剖，然后投入到有1mol/L盐酸的烧杯中，室温下酸解3min，再将烧杯移入58～60℃的水浴锅中，继续酸解8min。

1。2。5 酶解与洗涤来*自~优|尔^论:文+网www.youerw.com +QQ752018766*

倒去多余的热HCl溶液，去离子水漂洗2次，每次10min。吸出根尖材料，浸入1～2滴混合酶液（纤维素酶﹕果胶酶=1﹕1）中，室温下酶解40min左右，或在28℃恒温箱中酶解20 min左右。

吸去酶液，加去离子水，用吸管换洗几次，除去残留酶液后加入45%醋酸。

1。2。6 染色

吸水纸吸干多余水分，把吸干水后的根放在载玻片上，将多余的根切除，只保留2mm根尖部分，用胶头滴管滴半滴石碳酸—品红溶色液。染液和根尖完全接触后，将载玻片在酒精灯上稍微加热，使染液聚拢成水滴状将根尖包住。待染液半干后，镊子夹住盖玻片一角，使盖玻片一侧先与载玻片接触，然后慢慢放下整个盖片，抽出镊子。

1。2。7 压片

在材料周围保留半滴45%醋酸，用吸水纸盖住整张盖玻片。同时左手固定住盖玻片，右手指从吸水纸的左端向右端轻轻抹过去，压片过程中不能使盖片发生移动。预先找准材料位置后，用橡皮隔着吸水纸用力敲击10下，敲击时要从中心向四周敲，使细胞和染色体均匀散开（压片时控制力度，注意控制盖玻片和载玻片间不发生滑动）。等待染色0。5～1h（也可在冰箱内染色12～24h）。

1。2。8 镜检

把压制好的装片放在显微镜下观察，先观察细胞的分散状况和处于中期分裂相的细胞多少，以确定所制装片是否符合鉴定，以及记录下相对应的取材时间。再检查中期分裂细胞中的染色体是否完全散开。假如染色体分散的情况不好，难以观察或计数，可取下装片重新放到桌面上，重新使用笔头重复敲片操作，或直接用手指在盖玻片上轻轻用力挤压。如果操作仔细，用力适度，便可很容易得到分散状况良好的染色体标本，便可进行下一步的观察、计数和照相。