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1。2  小酸浆DNA提取

本实验采用生工Ezup柱式基因组DNA抽提试剂盒（植物）提取野生小酸浆基因组DNA，具体步骤如下：

1）剪取新鲜野生小酸浆叶片约100 mg，剪碎后放入液氮预冷的研钵，并将剩余叶片于–80 ℃保存。往研钵中立即加入液氮研磨至粉末并迅速转移至预冷的1。5 mL离心管中。

2）加入600ul 65℃预热的Buffer PCR和12ulβ-巯基乙醇。震荡混匀后在65℃水浴锅中水浴25分钟，间或混匀。来*自~优|尔^论:文+网www.youerw.com +QQ752018766*

3）待离心管冷却至室温后，加入600ul氯仿，充分混匀，12000rpm离心5分钟，吸取上清液约200ul至干净的1。5ml离心管中。

4）加入等体积Buffer BD，颠倒混匀3-5次，再加等体积的无水乙醇，充分混匀后用移液器吸取并全部转移到吸附柱中，室温静止2分钟。10000rpm离心1分钟，倒去收集管中的废液。

5）将吸附柱放回收集管，加入500ulPW Solution，10000rpm离心1分钟，倒去收集管中的废液。

6）将吸附柱再次放回收集管，加入500ulWash Solution，10000rpm离心1分钟，倒去收集管中的废液。

7）12000rpm空转离心2分钟。

8）取出吸附柱，放入一个新的1。5ml离心管中，在吸附膜中央加入50ul TE Buffer，静置3分钟，12000rpm离心2分钟，得到所需的DNA放于–20 ℃保存。