水稻小粒突变体sg1的分离和基因克隆(2)_毕业论文

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水稻小粒突变体sg1的分离和基因克隆(2)

毕业论文关键词:水稻粒型;SSR标记;杂交;连锁标记

Key words:Grain shape; SSR marker; F2 population; linkage marker

目录 4

引言 5

1 材料与方法 5

1。1  实验材料 5

1。2  培养方法 5

1。2。1 DNA提取 5

1。2。2 分子标记检测 6

1。2。2。1 PCR扩增 6

1。2。2。2 琼脂糖凝胶电泳 6

2  过程与原理 6

2。1 实验过程 6

2。1。1 混池连锁标记 6

2。1。2 单株连锁标记 6

2。1。3 扩大模板数量 7

2。1。4 基因克隆 7

2。2 实验原理 7

2。2。1 DNA提取原理 7

2。2。1。1 磨样 7

2。2。1。2 水浴 7

2。2。1。3 加氯仿 7

2。2。1。4 加异丙醇 7

2。2。1。5 加乙醇 7

2。2。2 PCR扩增原理 8

2。2。3 凝胶电泳原理 8

3  结果与分析 9

3。1 实验结果 9

3。1。1 小粒突变体sg1的形态特征 9

3。1。2小粒突变体sg1的基因定位 10

3。2 实验结果分析 13

3。2。1 EMS诱导法 13

3。2。2基因定位 13

4  讨论与展望 13

参考文献 15

致谢 15

引言水稻产量的提高一直是科学家研究的课题。众所周知,水稻之所以重要是因为它是人类主要的食物。人类一天活动主要依靠的能量就是来自于水稻的淀粉。因此,对水稻的研究一直是一个重要课题[3]。国际水稻基因组测序计划(International Rice Genome Sequencing Project, IRGSP)现已全部完成,水稻12对染色体的基因组序列已被确定。为本实验提供重要依据[5]。研究水稻产量,主要是从三个方面探究。一是水稻的穗数,二是水稻每条穗的颗粒数,三是每个颗粒的饱满程度,也就是水稻的重量。其中,水稻重量占据重要地位,而粒重与籽粒大小有着密切联系。因此,了解控制水稻籽粒大小的分子机制具有较大的研究价值[8]。至今,已有多种水稻粒形相关基因被克隆[6]。如H346/L32 以及Kitaake中的小粒基因Mi1和Mi2[1]; 伴随籽粒纹理性状出现小粒性状的基因LGT,伴随芒性状出现小粒性状的基因AN6、AN7等等。本次实验的实验对象是EMS诱变得到的小粒突变体sg1,成功对小粒基因SG1进行分离和克隆。论文网

1 材料与方法

1。1  实验材料

选取突变体sg1与野生型水稻9311杂交,获得的F1群体全为野生型表型。将F1群体进行自交,获得F2分离群体,发现分离群体中野生型与突变体表型个体比例为3:1,说明该突变为隐形突变。选取F2群体中突变体表型的单株200株作为本次实验的实验材料。 (责任编辑:qin)