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③预培养药品：70%酒精、10%次氯酸钠、无菌水、氢氧化钠、盐酸、培养基（1\2MS）：2。37克MS粉+100ml蒸馏水+20g蔗糖混匀后调PH至5。8，分装到500ml瓶子，每瓶330ml，加入2。5g琼脂粉

 ④实验地点：试验于2017年3月06日到2017年4月30日在上海应用技术大学第二学科楼四楼组培实验室407中进行；实验拟南芥定植在上海应用技术大学第二教学楼B402实验室进行。试验数据观测上海应用技术大学第二教学楼A401实验室进行。

2。2。2实验方案

      ①配置培养基（1\2MS）：

使用电子天平量分别取2。37克MS粉、20g蔗糖后放入烧杯中，使用量筒量取100ml蒸馏水加入烧杯中，使用磁力搅拌器混匀，在搅拌的过程中使用电子PH计（先进行校准后使用蒸馏水清洗探头）测量PH,使用少量NAOH或稀盐酸调PH至5。8后分装到500ml瓶子，每瓶330ml，加入2。5g琼脂粉后放入高压灭菌锅进行煮沸灭菌备用。

        ②种子萌发：来,自,优.尔:论;文*网www.youerw.com +QQ752018766-

2。1植物材料：野生拟南芥种子（CK），转入液泡焦磷酸酶基因的拟南芥种子(VP1、VP8)

2。2种子预处理：70%酒精处理90秒，10%次氯酸钠15min，超净工作台上使用无菌水冲洗三次以上，

2。3培养基：检查步骤①中备用培养基是否被污染，准备好的没有被污染的瓶装培养基放入微波炉中，加热10min至煮沸无琼脂块后取出，放在超净工作台冷却后，倒入高压灭菌后的培养皿中进一步冷却。

2。4接种：将消毒后的种子接种在已充分冷却凝固的培养皿中，使用封口膜密封，贴好标签后转入灯光培养室内培养7日发芽