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    发酵培养基：0。2% YNB，1%葡萄糖，5 mmol/L乙酰胺（分子量59 g/mol)，用0。1 M磷酸缓冲液（pH 6。0）配制，121 ºC高温灭菌20 min。250 mL锥形瓶装液量50 mL。(乙酰胺需过滤除菌）。A液：锥形瓶中加入0。1g YNB粉末和24 mL 磷酸缓冲液（pH 6。0）。 B液：锥形瓶中加入0。5g葡萄糖和25 mL磷酸缓冲液（pH 6。0）。将A液和 B液放入灭菌锅121 ºC高温灭菌20 min。在超净工作台上将A液和B液混合，再加1 mL乙酰胺，混匀。来,自,优.尔:论;文*网www.youerw.com +QQ752018766-

2。2。2试剂

    DNS：将1416 mL蒸馏水、19。8g氢氧化钠和10。6 g 3,5-二硝基水杨酸混合，溶解后加入306g酒石酸钾钠、7。6mL苯酚（50℃熔化）、8。3g偏重亚硫酸钠，避光存储。

5 mmol/L 乙酰胺：称量1。475g乙酰胺溶于100 mL的0。1 M磷酸缓冲液（pH 6。0）中，过滤除菌，分装在1。5 mL的EP管中。-20℃冻存备用。

0。1 M磷酸缓冲液（pH 6。0）：1 L蒸馏水中加入13。682 g二水磷酸二氢钠和4。405 g十二水磷酸氢二钠。

     2。0%菊粉底物：称取2。0 g菊粉，加入约50。0 mL蒸馏水，60-70ºC水浴，慢慢搅拌直至菊粉完全溶解，冷却后加入10。0 mL 0。1 M磷酸缓冲液（pH 6。0），并加水至100。0 mL，-20 ºC保存。

    10 mg/mL的果糖标准溶液：用电子天平准确称量100 mg果糖溶于10 mL蒸馏水中，充分混匀。