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1。1 试验材料

本次实验种子谷子，麦子，高粱，玉米为2015年年初种子，获取于徐州市七里沟农贸市场。

编号

No。 品种名称

   Variety name 学名

1 谷子    Setaria italica

2 高粱 Sorghum bicolor(L。) Moench

3 玉米 Zea mays L。

4 麦子 Triticum aestivuml

1。2 试验试剂 

   渗透势溶液的配置：用聚乙二醇-6000配成的，0、2。5%、5%、7。5%、15%、20%的不同浓度梯度的PEG溶液，模仿不同水准的干旱胁迫。 

2%淀粉溶液，0。4mol/LNAOH，组成0。2g/100ml的麦芽糖溶液。论文网

使用ph为5。6的柠檬酸缓冲溶液，少批蒸馏水，再称出柠檬酸20g左右，加水到1000毫升的烧瓶上边刻度，为α液。运用柠檬酸钠29。41g固体，用玻璃棒搅拌使之融化，后加水到1000毫升，为β液。使用α液13。75ml与β液26。35ml放一起震荡均匀，即为所需得到的缓冲液（ph5。6）。

    称量1g的3,5-二硝基水杨酸，添加入体积为20ml的NAOH（氢氧化钠）1mol中，预先备好蒸馏水50ml，酒石酸甲纳30g再加入，静候溶解，使用蒸馏水稀释至烧瓶刻度（100ml），塞好试管塞子，避免其余气体进入。

1。3　试验方法　

1。3。1试验处理与方法

     选出外形丰满，质感相差无几的谷子，麦子，玉米，高粱种子，被3%NACLO浸泡大约8-12min后，蒸馏水冲好几次后吸干。在培养皿上铺上两张滤纸（看情况而定可适当增添），倒入PEG溶液（0%，2。5%，5%，7。5%，15%，20%），水平面要超过滤纸厚度，然后放上之前处理好的谷子，麦子，高粱各50个种子，玉米30个种子，摆放在滤纸上，冰为谷子，麦子，高粱设置三组平行，玉米设置六组平行。而后放于恒温培养箱中（25度）。为了维持滤纸本身的湿润和萌发环境，每天要根据事先设计好的浓度溶液，以没过种子为宜。种子露白且出须，作为种子萌发标志。以此进行干旱胁迫对种子萌发的影响实验。

     种子刚刚萌发时候，测定淀粉酶含量，每2d换一次纸，避免浓度变更。培育至延续两天种子萌发不再增长为止。完成种子发芽数目的测量，然后依次整理各个指标。

1。3。2淀粉酶活性测定

   (1)α-淀粉酶的提取:

取小麦，高粱种子各5粒,谷子50粒，玉米个两粒，研磨成粉,找到5ml的小型离心管，放入4000转每分钟的离心机上离心，以离心机盖子打开停止运营，取得上清液，即初步粗酶液。

  (2)α-淀粉酶的计算（通过吸光度值求麦芽糖含量）：

1、制作标准曲线的制作（见下表0）

拿有瓶塞和刻度的20ml试管7支，清洁且灭菌加干燥，依次编号（如下表2号码），后按表添加准备好的试剂（表2），在一旁准备好冷水，打开水浴锅，煮沸前放入试管，等待大约5分钟，取出，用流水使之冷凝。待到室温状态时，每个试管加蒸馏水置刻渡，后在520nm处测OD值。并建立回归方程。

试剂 1     2 (责任编辑：qin)