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油菜是重要的油料作物，也属于花卉类蔬菜，鲜嫩的油菜花可食用。油菜花性凉、味甘，所含的植物激素能够刺激酶的形成，排斥并吸附掉人体内的致癌物质，改善肝脏的排毒功能，预防心血管疾病、肠胃疾病和伤风感冒等；其中黄酮类化合物含量丰富，油菜蜂花粉黄酮主要为黄酮醇苷类，主要包括槲皮素、山奈酚、异鼠李素、柚皮素、芦丁。有研究表明，经乙酸乙酯萃取油菜蜂花粉，萃取物具有明显的抗氧作用，能显著降低D-半乳糖诱导衰老小鼠肝组织中丙二醛（MDA）含量和脑组织中单胺氧化酶（MAO）活力；进一步鉴定提取物成分，所含主要为黄酮类化合物[8]。曹炜将鼠红细胞膜预先用油菜花粉黄酮处理后，膜脂的MDA含量明显下降，呈现剂量与效应关系，膜脂流动性显著提高，表明油菜花粉黄酮对·OH、O2-·引起的鼠红细胞膜的氧化损伤有保护作用[9]。

黄酮类化合物的提取方法主要有三类，分别是有机溶剂萃取法、溶剂萃取改良精加工法、超临界流体偶联提取法。植物中的黄酮类化合物分布在植物体的不同组织器官中，其中在花、叶、果中常以糖苷的形式存在，而在根部坚硬组织中，则多为游离苷元形式存在。植物的不同组织器官中黄酮类化合物的提取方法也存在差异。溶剂提取法是常用的黄酮类化合物提取方法，此方法主要制备的是黄酮类粗物质。自然界中的黄酮类化合物多以糖苷形式存在，可溶于极性较大的有机溶剂中，根据相似相容原理，常用乙醇、丙酮、甲醇、乙酸乙酯等有机溶剂提取。相比丙酮、甲醇的较大毒性，乙醇更为安全无毒、经济环保，且具有价格低廉、便于回收等优点，因此应用范围最为广泛。不同浓度的乙醇适宜提取的黄酮类化合物也不相同，90%-95%的高浓度乙醇适宜用于提取黄酮苷元，60%左右的中浓度乙醇适宜用于提取黄酮苷类。在众多提取方法中，以加热回流提取法、索式抽提法为代表的溶剂提取法仍然占主导地位。

黄酮类化合物的分析鉴定方法主要有络合比色法、色谱法、色谱-质谱联用法、红外光谱法、核磁共振波谱法等。络合比色法（铝离子显色法）是当前比较常用的一种测定总黄酮含量的方法，已发表的中草药、中药制剂中总黄酮类化合物含量的测定方法约72%是用该方法检测的。一般采用 Al(NO3)3和 AlCl3两种试剂络合黄酮类化合物来测定其含量[10,11]。在有亚硝酸钠存在的碱性条件下，Al(NO3)3与黄酮化合物络合后显红色，以芦丁为标准品在 500nm 左右测定吸光度。但该方法存在测定黄酮化合物专属性不强的缺点，常会遇到非黄酮类物质显色进而造成样品总黄酮含量检测值偏高的情况。

黄酮类化合物是植物体内重要的次生代谢产物，具有多种生物活性如抗癌、抗病毒、抗菌等，其生物活性的基础是抗氧化性。目前已经建立了多种方法用于评价黄酮类化合物的抗氧化活性，铁离子还原法（FRAP）是常用的对总抗氧化能力进行评价的方法[12]。在较低pH环境下，非酶抗氧化剂可被看作还原剂，将Fe3+与三吡啶三吖嗪（TPTZ）形成的复合物（Fe3+-TPTZ）还原为Fe2+，呈现蓝色，在593nm处有最大光吸收，根据吸收值大小计算样品抗氧化活性的强弱，相对清除单一自由基的抗氧化能力更加全面、准确[13,14]。卢引等用槲皮素建立了FRAP抗氧化微量筛选微量模型，相比分光光度法，样品消耗量小，操作简单[15]。文献综述

本研究以我国自主培育的抗草铵膦油菜为研究材料，通过乙醇加热回流的方法提取油菜花总黄酮，并对油菜花粗黄酮的总抗氧化活性进行评价，希望我们的研究工作能为转基因油菜作物的安全性评价提供理论参考。 (责任编辑：qin)