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甲基红试剂：甲基红0。04g，95％乙醇60 mL，蒸馏水40 mL。

2。1。4 仪器

表2 仪器

仪器名称 型号 制造商

电子天平 BS224S 北京赛多利斯仪器系统有限公司

超净工作台 SW-CJ-2D 苏州净化设备有限公司

低速离心机 TDL5-A 上海安亭科学仪器厂

高压灭菌锅 LS-75HJ 江阴滨江医疗设备有限公司

微波炉 LG 乐津电子（天津）电器有限公司

恒温培养箱 GNP-9080 上海精宏实验设备有限公司

电热恒温鼓风干燥箱 DHG-9420B 上海三发科学仪器有限公司

冰箱 BCD-215KALM 青岛海尔股份有限公司

组合式全温摇床 HD-930 太仓市博莱特实验仪器厂

数码生物显微镜 尼康E100 尼康株式会社

紫外可见分光光度计 722S 上海精密科学仪器有限公司

甲醛检测仪 MEF500 思乐智检查设备（上海）有限公司

2。2 方法

2。2。1 甲醛降解菌的初筛 

将采集的样品按照10-3、10-4、10-5稀释倍数稀释，然后涂布到基本培养基上，37℃培养48h。获得大小不同的菌落。

2。2。2 甲醛降解菌的复筛 

将初筛所得的不同菌落分别接种在以高浓度甲醛为唯一碳源的摇瓶上进行复筛，若菌液浑浊，则表明该菌株具有高降解率。

2。2。3菌落形态观察及生理生化特性研究 

把筛选的菌株接种到牛肉膏蛋白胨培养基上，观察入选菌株的菌落特征，并对菌株进行一系列常规的生理生化实验，初步确定菌株的分类地位。

2。2。3。1 革兰氏染色

（1）滴加一滴无菌水于干净载玻片上，取平板上的单菌落，涂布与无菌水中中，在酒精灯火焰上方烘烤固定。

（2）滴加少量结晶紫混合染液于涂面上染色1 分钟后，用清水慢慢冲洗。

（3）滴加碘液覆盖于涂面染l 分钟后水洗，用吸水纸吸去玻片上的水分。

（4）滴加95％酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，30 秒后水洗，用吸水纸吸去玻片上的水分。

（5) 用蕃红液染色2～3 min后，用自来水冲洗，干燥，镜检。染色结果观察，深紫色为革兰氏阳性细菌，红色为革兰氏阴性细菌。

2。2。3。2生理生化特征

    对菌株的生理生化特征进行测定，包括明胶液化、葡萄糖氧化发酵、柠檬酸盐的利用、木糖的利用、甲基红试验、接触酶试验。测试方法参照常规细菌学方法进行。

（1）明胶液化

配制明胶培养基于试管中，取新鲜的菌种穿刺接种，未接种的明胶培养基作为空白对照。将培养基于20℃培养箱中培养2～7 d，观察的该菌生长情况并且对比空白对照观察明胶是否液化。如果细菌己经生长且明胶表面无凹陷（仍为稳定的凝块），则该菌株为明胶水解阴性。如果在20℃以下明胶凝块部分或全部变为可流动的液体，则该菌株为明胶水解阳性。 (责任编辑：qin)