紫茎泽兰GAS转基因毛状根及再生植株培养体系的建立与鉴定(2)

Keyword: β-elemene; Eupatorium adenophora Spreng ; Transgene; Germacrene A synthase gene;

1。引言 7

1。1紫茎泽兰及榄香烯的简介 8

1。2榄香烯及其衍生物的药用价值 8

1。3榄香烯的生物合成途径 8

1。4毛状根及转基因技术 9

1。5毛状根生成再生植株 10

1。6本研究目的及其意义 10

1。7本研究的技术路线 10

2。实验部分 12

2。1 实验材料及试剂 12

2。1。1 植物材料 12

2。1。2 菌株和质粒 12

2。1。3 仪器设备 12

2。1。4试剂及试剂盒 13

2。2 实验操作方法及步骤 14

2。2。1 紫茎泽兰种子无菌萌发 14

2。2。2 紫茎泽兰无菌苗的继代培养 15

2。2。3目的基因的获得及重组质粒的构建 15

2。2。4 C58C1农杆菌感受态细胞的制备（CaCl2法） 20

2。2。5重组质粒转化C58C1感受态细胞 20

2。2。6 C58C1重组菌株的活化 22

2。2。7 紫茎泽兰毛状根的诱导 22

2。2。8 紫茎泽兰毛状根的PCR鉴定 22

2。2。9 紫茎泽兰毛状根再生植株的诱导 24

2。2。10 紫茎泽兰毛状根再生植株的PCR鉴定 24

3。结果与讨论 25

3。1紫茎泽兰无菌苗系统来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766 的建立 25

3。2工程菌的验证 27

3。2。1重组质粒双酶切验证 27

3。2。2工程菌液的验证 27

3。3紫茎泽兰毛状根的诱导 29

3。4紫茎泽兰毛状根的PCR鉴定 29

3。5紫茎泽兰毛状根再生植株的PCR鉴定 30

4总结与展望 31

致谢 32

参考文献 33

1。引言

1。1紫茎泽兰及榄香烯的简介

紫茎泽兰（Eupatorium adenophora Spreng）：是多年生草本和成半灌木状植物【1】。它的分枝对生，根茎粗壮，直立，株高为30-200厘米、斜上，茎紫色。叶对生，叶片质薄，卵形、三角形或菱状卵形，腹面绿色，背面色浅，边缘有稀疏粗大而不规则的锯齿，在花序下方则为波状浅锯齿或近全缘。头状花序小，直径可达6毫米，在枝端排列成伞房或复伞房花序，约含40-50朵小花，管状花两性，白色。子实瘦果，黑褐色。每株可年产瘦果1万粒左右，藉冠毛随风传播。花期11月-翌年4月，结果期3月-4月。

紫茎泽兰原产地是美洲的墨西哥和哥斯达黎加一带，分布于澳大利亚、美国、南非、新西兰、西班牙、印度、菲律宾、马来西亚、新加坡、印度尼西亚、巴布亚新几内亚、泰国、缅甸、越南、中国、尼泊尔、巴基斯坦以及太平洋岛屿等30多个国家和地区。论文网紫茎泽兰GAS转基因毛状根及再生植株培养体系的建立与鉴定(2):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_189879.html