1。2。6。2 反转录 8

1。2。6。3 RT-qPCR定量功能基因 8

2 结果分析 9

2。1 四环素添加对反硝化菌群的影响 9

2。1。1 生物多样性分析 9

2。1。2 微生物菌群结构分析 10

2。2 四环素添加对四环素抗性基因、intI1及功能基因丰度的影响 10

2。3 TRGs与intI1的相关性分析 13

3结论 15

上流式厌氧污泥床（UASB）反应器是集有机物去除及泥、水和气三相分离于一体的废水处理工艺[1]。其工艺的最突出特征是能够形成极高浓度的污泥床，培养出沉降性能良好的颗粒污泥，使其能够承载更高的容积负荷。来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766

反硝化是指在厌氧或缺氧的环境中，反硝化细菌处理含氮废水，将硝态氮和亚硝态氮还原成为气态氮的过程，氮气和二氧化碳是该过程的最终产物，而且不会产生二次污染。目前反硝化工艺是国内外生物脱氮技术研究的热点，其主要包括OLAND工艺，SHARON工艺和CANON工艺。同时国内外专家学者也对A/O，SBR，MBR，曝气生物滤池等工艺的硝化反硝化进行了深入研究[2]。反硝化菌是在反硝化工艺中是能引起反硝化作用的细菌，大多为异养、兼性厌氧细菌，在土壤和污水中分布较广泛。不同碳源、不同碳氮比、温度、pH值以及溶解氧DO等都对反硝化作用有显著的影响[3]。

四环素类抗生素（Tetracycline antibitics，TCs）是一类由链霉菌产生或经半合成制取的广谱抗生素，具有相同的氢化骈四苯基本母核，能够抑制细菌蛋白质的合成，因此被广泛用于细菌感染疾病的治疗。TCs属于抑菌型抗生素，主要用于各种革兰氏阳性菌和阴性菌所导致的感染。四环素是如今最便宜的一类抗生素，因此其在医疗保健预算有限的发展中国家频繁使用[4-7]。有研究表明，TCs在环境中的普遍残留可引起抗药性菌群的富集及抗性基因的演变和传播[8]。抗性基因（Antibiotics resistance genes，ARGs）作为一种新型环境污染物[9]，已引起国内外环境工作者的广泛关注抗生素以及抗生素抗性在环境中的行为是近年来环境领域的一个研究热点。国内外的研究机构大量的监测到了不同抗生素以及ARGs环境中的分布。迄今为止，国内对环境中ARGs的研究尚在起步阶段，以四环素为代表的抗生素在活性污泥中的行为，以及对反硝化工艺中微生物菌群结构变化尚不明确。有关研究表明四环素改变了土壤微生物群落碳源利用多样性和物种丰富度[10-11]。Hamscher[12]等在液体粪肥中检测到四环素含量为4。0 mg kg-1，金霉素为0。1 mg kg-1。Le[13]等研究表明，四环素类和磺胺类药物在地表水中浓度为0。03~0。06 μg L-1，而在水产养殖场的水样中浓度为1~6 mg L-1。Hyunook Kim[14]等在研究畜禽废水中四环素类药物时，检测到处理厂在处理单元中最高浓度分别为49。5 μg L-1和4。1 μg L-1。Gao[15]等在密歇根州东兰辛废水处理厂（传统市政废水处理厂）收集的进水原样中，四环素类和磺胺类药物总浓度分别为1。129±0。8 μg L-1和1。5359±0。64 μg L-1。

反硝化工艺具有降低能耗、节约碳源和减少污泥产量等优点,是公认的高效生物脱氮途径。通常抗生素及ARGs都是以多种混合物形式存在于废水中，如养殖业废水、制药废水和生活污水等。因此，我们有必要对四环素对反硝化菌群及ARGs的影响进行研究。本论文拟着重研究四环素对反硝化工艺菌群的影响，包括对微生物菌群结构及四环素类抗性基因（Tetracycline resistance genes，TRGs）动态变化的影响，为实际废水处理厂的应用和推广奠定一定的理论基础，以期改善和提高工艺效率。论文网 四环素对反硝化工艺菌群影响的研究(2):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_195444.html