3。1。2 黑曲酶总 RNA 提取最佳时间的确定 14

3。2 黑曲霉总 RNA 提取的结果 14

3。3 RT-PCR 扩增结果 15

3。4 重组子筛选结果 15

3。5 重组质粒的电泳检测结果 16

3。6 双酶切验证结果 17

4 结论 18

参考文献 19

致谢 20

1 前言

1。1 木聚糖源G于J优L尔V论N文M网WwW.youeRw.com 原文+QQ75201`8766

木聚糖(xylan)是一种存在于植物细胞壁中的异质多糖，是植物半纤维素(hemicellose) 的主要成分,是一种丰富的生物质资源，是自然界中除纤维素之外含量最多的多糖[1]。大 多数木聚糖含有许多不同的取代基，结构复杂，无法直接被利用[2]。

1。2 木聚糖酶

木聚糖酶是降解木聚糖的一类酶的总称，由外切木聚糖酶和内切木聚糖酶这两大类构 成[3]。前者从主链内部作用于木糖苷键,将木聚糖分解成低聚糖,而后者则作用于低聚木糖 的末端,释放出木糖[4]。木聚糖酶来源很广泛，可以从植物、动物和微生物中获得，由于 木聚糖酶来源广泛、结构复杂，使得木聚糖酶具有多样性。正是由于木聚糖的这些多样性， 使得其各种理化性质有所不同，因此对于木聚糖酶的研究主要源自于对细菌和真菌中木聚 糖酶基因的研究[5]。主要性质有以下几点：①分子质量: 多数木聚糖酶是单亚基蛋白，分 子质量在 8 ～ 145 kDa[6]②等电点 pI 范围为 3～10。5③大多数酶的反应最适 pH 范围在 4～ 7，最适反应温度为 40～60℃。

1。3 木聚糖酶的应用

木聚糖酶的应用领域非常广泛，近几年来，木聚糖酶在造纸、饲料、食品等许多行业 发挥了重要的作用。

1。3。1 木聚糖酶在造纸行业的应用

木聚糖酶在纸浆加工过程中起到了重要的作用，通过在未漂浆中加入木聚糖酶，可以 使木素-木聚糖复合体中的木聚糖溶出，使得化学漂白剂更有效的进入到纸浆中，从而增 加了漂白剂与木素的接触机会，易于漂白。同时，木聚糖酶还能促进细胞壁的润胀[7]，加 快漂浆在纤维细胞壁的扩散速度，利于木素的脱落。此外，木聚糖酶还可溶解纤维表面的 木聚糖，以利于漂液与纸浆中残余的木素进一步作用，提高漂白的效果。

1。3。2 木聚糖酶在饲料行业的应用

木聚糖是普遍存在于植物性饲料原料中的多糖，可将饲料的营养成分锁在细胞壁内， 部分纤维溶于水后可产生黏性物质，妨碍动物对饲料中营养物质的吸收，对动物的消化功 能产生影响。木聚糖还可以对动物的消化酶、肠道造成危害，不利于家禽家畜的健康，为 饲养者带来经济上的损失。通过在植物性饲料中配合使用木聚糖酶，可将木聚糖去除，将 锁在其内的营养成分释放出来，增加蛋白和代谢能的利用率。又因木聚糖酶为无公害的饲

料添加剂，必将成为一种在养殖业中广泛应用的酶制剂[8]。 黑曲霉中木聚糖酶基因的克隆(2):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_197567.html