活血丹G. longituba (Nakai) Kupr.为唇形科活血丹属多年生草本植物又名遍地香、地钱儿、透骨消、透骨风、团经药、金钱薄荷等,以其干燥地上部分入药,药材名为连钱草,功擅利湿通淋、清热解毒、散瘀消肿,用于治疗热淋、石淋、湿热黄疸、疮痈肿痛、跌打损伤[9]。现代药理研究表明其具有利尿利胆,降脂、溶石,降血糖,抗炎、抗菌的作用[10]。活血丹喜阴湿,对土壤要求不严,但以疏松、肥沃、排水良好的砂质壤土为佳;适宜在温暖、湿润的气候条件下生长。在我国除西北外,全国各地均有分布[11]。迄今为止,土壤容重对活血丹的影响还未见相关报道。
目前从活血丹中分离得到的化学成分主要有萜类、黄酮类、有机酸类、挥发油等[12-14]。三萜类的主要成分为熊果酸(ursolie acid,UA),具有镇静、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗溃疡、降低血糖等多种生物学效应,还具有明显的抗氧化功能。许多中药材及其制剂常选用熊果酸的含量作为其质量控制指标。三萜类的另一主要成分为齐墩果酸(Oleanolic acid,OA)主要有保肝、降转氨酶[15]、降脂降糖、抗炎、强心利尿、抗突变抗癌等作用[16]。活血丹中有黄酮类化合物十余种[17],具有保护心脑血管、利胆保肝、抗癌等多种生物活性[18]。活血丹中挥发油成分复杂,包括酮类、萜烯类、醇类、烷烃类及萘类[19],其中醇类大多散发让人兴奋的调和气,具有抗感染、抗病毒的作用[20];萜类大多具有抗菌,止痛消炎的作用[21]。抑菌试验表明,连钱草对金黄色葡萄球菌极度敏感,对痢疾杆菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌中度敏感[22]。
本实验以活血丹植物作为研究材料,研究土壤不同容重条件下,活血丹生长、生理指标变化,及其内醇溶性浸出物和总黄酮、齐墩果酸和熊果酸等次生代谢产物积累情况,筛选活血丹生长适宜的土壤容重,以期活血丹人工种植技术的完善提供参考。
1 材料与方法
1.1 试验材料
本试验所用的活血丹材料采自江苏省南京市紫金山,经南京农业大学郭巧生教授鉴定为唇形科活血丹属植物活血丹G. longituba。2016年7月,于南京农业大学中药材研究所试验大棚内将采集的活血丹材料盆栽扦插(每盆5株),并自然越冬。2017年3月,植株恢复生长后选择生长健壮、无病虫害侵染、长势相近的旺盛生长期植株测得指标。
试验采用土培盆栽的方法,供试土壤采自紫金山。每个花盆填装相同体积土壤,通过向普通黏土中掺入不同重量的蛭石,经多次深翻混匀,并人工层层压实,改变土壤容重。共设计6个不同处理,土壤容重依次为0.8 g•cm-3、0.9 g•cm-3、1.0 g•cm-3、1.1 g•cm-3、1.2 g•cm-3、1.3 g•cm-3,每个处理5盆重复。
表1 不同土壤容重的处理
处理 R1 R2 R3 R4 R5 R6
土壤容重(g•cm-3) 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3
1.2 仪器与试剂
仪器:分光光度计(AlpHa-1506,上海市谱元仪器有限公司)、烘箱(DHa-3140N,上海精宏实验设备有限公司 大仓精宏仪器有限公司)、台式高速冷冻离心机(5811XL441125,德国Eppendorf -AG)、超声波清洗机(PS-60A)、电子天平(BSM220.4,上海卓精电子科技有限公司)、美国Waters 2695/2996型液相色谱仪(美国Waters公司)。
试剂:蒽酮,乙醇,磺胺,萘基乙烯胺,石英砂,碳酸钙,浓硫酸,亚硝酸钠,甲硫氨酸,NBT,EDTA-Na2,核黄素,NaH2PO4•2H2O,KNO3,Na2HPO4,无水乙醇,TCA,牛血清蛋白,高锰酸钾,过氧化氢,硫代巴比妥酸(TBA),甲醇,醋酸钠,醋酸,三氯化铝,氢氧化钠,乙腈(除乙腈、甲醇为色谱纯外,其余均为分析纯)。 土壤容重对活血丹生长及其药材品质的影响(2):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_21931.html