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水稻斑马叶突变基因zebra leaf3的精细定位(4)

时间:2018-10-17 11:45来源:毕业论文
YSA 3 幼苗白化 PPR protein ysa mutant Su et al., 2012 PAPST1 1 缺绿 3-phosphoadenosine 5-phosphosulfate transporter1 papst1 mutant Xu et al., 2013 VYL 3 黄化转绿 OsClpP6 vyl mutant Dong et a


YSA    3    幼苗白化    PPR protein    ysa mutant    Su et al., 2012
PAPST1    1    缺绿    3’-phosphoadenosine 5’-phosphosulfate transporter1    papst1 mutant    Xu et al., 2013
VYL    3    黄化转绿    OsClpP6    vyl mutant    Dong et al., 2013
YLC1    9    幼叶黄化    a protein of DUF3353 superfamily    ylc1 mutant    Zhou et al., 2013
YGL2    6    黄绿叶    Heme Oxygenase 1    ygl2 mutant    Chen et al., 2013
ZN    6    斑点叶-
绿黄相间    a thylakoid-bound
protein of unknown function    zebra-necrosis  mutant    Li et al., 2010
SPP    6    缺绿    the stromal processing peptidase    spp mutant    Yue et al., 2010
MPR25    4    浅绿    a pentatricopeptide repeat protein    tos17 knockout mutant    Toda et al., 2012
OsNOA1/RIF1    2    RNAi后
缺绿    nuclear-encoded cGTPase of likely prokaryotic origin    反向遗传    Liu et al., 2010
ObgC    7    缺绿    Spo0B-associated GTP-binding protein
GTPase    T-DNA insertional mutant    Bang et al., 2012
CHR4    7    近轴白化    Mi-2 protein    chr4 mutant    Zhao et al., 2012
Ostrxm    12    RNAi后
浅绿叶    thioredoxin m    反向遗传    Chi et al., 2008
OsHAP3A ,OsHAP3B,OsHAP3C    1/5/5    RNAi后
浅绿叶    the A/B/C subuint of HAP3 complex    反向遗传    Miyoshi et al., 2003
1  材料与方法
1.1 材料
zl3是籼稻9311由化学诱变剂甲基硫磺乙酯(EMS)诱变获得的,经多代自交,其斑马叶性状能稳定遗传。将zl3与野生型籼稻9311种植于南京农业大学土桥水稻实验基地,并将zl3与02428配置杂交组合得到F1。同年,在海南陵水县种植F1并观察F1表型并获得F2种子。隔年,对F2群体中正常叶色和斑马叶水稻株数进行数据统计。
1.2 植株表型的鉴定
水稻斑马叶突变体是由籼稻9311经EMS诱变产生的。籼稻品种9311、突变体zl3以及突变体与粳稻品种02428配制的F2群体种植于南京农业大学牌楼教学实验基地和培养箱中,待表型明显期,挑选极端单株用于基因定位。在大田条件下,叶片在发芽后5天和8天剪取叶片并观察表型,幼叶表现为淡绿色且有斑马条纹,随着温度的变化以及幼苗的生长叶色恢复为绿色,但与野生型相比,叶色仍稍淡。
1.3 农艺性状的调查
野生型和zl3突变体生长到抽穗后期,分别调查它们的株高、穗长、剑叶长宽、倒二叶长宽、有效穗数;收获后,穗子50℃烘干,调查每穗粒数、千粒重以及结实率;每个性状10个重复。
1.4 遗传分析
    配置杂交组合9311/zl3和zl3/9311,将获得的F2群体种植于培养箱中,调查每个组合中野生型表型和突变体表型的个数,进行遗传分析。
1.5 光合色素含量测定
    叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量的测定采用Su 等(2012)的方法,具体步骤如下:横向剪取光照培养箱中野生型9311和突变体zl3相同叶龄的叶片30mg左右,碎片约2mm长,设置3个重复,每个样品中加入5ml的96%的酒精提取液,室温黑暗放置48 h,期间多次轻摇混匀,之后离心机12000rpm/min离心10 min去除残留的植物组织残渣。上清用紫外分光光度计(Beekman DU800 USA)测定波长为663 nm、645 nm和470 nm处的吸光值并进行记录。叶片单位鲜重或单位面积的叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量的计算采用Lichtenthaler(1987)的方法。每批试验样品都重复3次测量并求平均值。计算公式如下: 水稻斑马叶突变基因zebra leaf3的精细定位(4):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_24254.html
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