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海洋微生物降解低分子木质素化合物的研究(2)

时间:2020-06-17 20:32来源:毕业论文
2.材料与方法 2.1 材料及器具 海底泥、香草酸粉末等各种上海生工购买的试剂、培养皿、锥形瓶、离心管、离心机、高压蒸汽灭菌锅、烘箱、超净工作台、


2.材料与方法  2.1 材料及器具    海底泥、香草酸粉末等各种上海生工购买的试剂、培养皿、锥形瓶、离心管、离心机、高压蒸汽灭菌锅、烘箱、超净工作台、分光光度计、载玻片、显微镜、DNA提取试剂盒、微波炉、电泳仪、PCR 仪、PCR 产物纯化试剂盒、生化管等。 
2.2 方法 2.2.1海水培养液 A液: NaCl 22.79 g, Na2SO4 3.98 g, KCl 0.72 g, NH4Cl 0.27 g, Na2HPO4·12H2O 0.119 g,NaBr 0.083 g,NaHCO3 0.031 g,H3BO3 0.027 g,NaF 0.0026 g,TAPSO 1.3 g,蒸馏水定容至 890 ml,调节 pH至7.6,使用前121 ℃,20 min 高压蒸汽灭菌;B 液:MgCl2·6H2O 11.18 g,CaCl2·2H2O 1.46 g,SrCl2·6H2O 0.024 g,加蒸馏水定容至100ml,使用前121 ℃,20 min高压蒸汽灭菌;C 液:FeCl2·4H2O 2 g,加蒸馏水定容至 100 ml,使用前过滤灭菌。海水培养液由 A、B、C 液按照890:100:10 的比例混合而成。 2.2.2营养培养液   89 ml的A液, 10 ml的B液混合后加入0.2 g胰蛋白胨、 0.1 g酵母粉, 121 ℃,20 min高压蒸汽灭菌后,加入 1 ml C 液。

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