1.3.3 POD 酶活性的测定

POD 活性的测定采用愈创木酚法[11]。取0.5g 毛豆，于0.05mol/L 磷酸缓冲液(pH=7.0)5mL 中，冰浴研磨，4℃冰冻离心机10000r/min 离心20min，取上清液测定酶活性。在100μL 粗酶液中加入4mL 0.3% 愈创木酚(用0.02mol/L、pH6.0的磷酸缓冲液配成)，然后加入50 μL 0.3% H2O2 (用0.2mol/L、pH =6.4的磷酸缓冲液配成)，混匀， 在722S 分光光度计上 每隔30s 记录1次数据变化值（在470nm 处的吸光度值），连续计5min，重复测定2次。 

1.3.4 抗坏血酸过氧化物酶 APX 酶活性的测定

  参照 Nakano 和 Asada（1981）的方法。称取 1g 果肉，加入 1.6 mL 预冷的磷酸缓冲液

（PBS-K）（ pH 7.8）提取液（含 1 mmol·L-1 AsA，3 mmol·L-1β-巯基乙醇，0.5 mmol·L-1PMSF，

2% PVP，1 mM EDTA）。用液氮研磨，提取液于 4 ℃，12000r/min 离心 20 min，上清液用 于酶活性的测定。取 0.10 ml 酶液，加入 1.70 ml 含 0.1 mM EDTA-Na2 的 PBS（0.05 mol/L， pH7.0），再加入 0.10 ml 5 mM 的 AsA，最后加入 0.10 ml 20mM H2O2，立即在 20℃下测定 A290 值在一定时间内的变化。

1.3.5 MDA 含量的测定

MDA 含量用硫代巴比妥酸法（TBA）[12]测定。取 3g 毛豆，于 0.05mol/L 磷酸缓冲液(pH 7.0)30mL 中，冰浴研磨，4℃冰冻离心机 10000r/min 离心 20min，取上清液测定酶活性。 在 1.0mL 粗酶液中加入 2.5mL 10.5%的硫代巴比妥酸（TBA）（用 10%三氯乙酸配制）， 沸水浴 20min，冷却后在 722S 分光光度计上分别测定 450nm、532nm、600nm 处吸光值。

1.4  数据处理

每个指标 3 个重复组测定数据，求平均值后，在 EXCEL 中进行数据处理与作图。

2  结果与分析

2.1 不同浓度 MeJA 对采后毛豆抗坏血酸含量的影响

抗坏血酸 ASA 在生物体中重要的抗氧化剂，及时清除细胞内自由基，保护细胞免遭活 性氧损害。如图 1 所示，在贮藏期间，毛豆 ASA 含量整体趋势呈缓慢下降，3 个不同浓度 MeJA 处理组的 ASA 含量都高于对照组。整体来看，10μmol/l MeJA 的 ASA 含量最高依次 是 50μmol/l MeJA 和 1μmol/l MeJA 的处理组。所以，10μmol/l MeJA 处理能有效维持 毛豆体内较高 ASA 含量，延缓细胞衰老。 来`自^优尔论*文-网www.youerw.com

2.2 不同浓度 MeJA 对采后毛豆 SOD 活性的影响

超氧化物歧化酶( SOD )是植物抗氧化系统中的重要酶，主要清除细胞中多余的超氧阴 离子，阻止对细胞膜系统造成伤害。如图 2 所示，10μmol/L MeJA 的毛豆的 SOD 活性 始终处于最高水平，第 6d 以后 MeJA 的处理组的 SOD 酶活性都比对照组的高。因此，10 μmol/L MeJA 能够维持毛豆贮藏期间较高的 SOD 活性。