(2)每种植株的每个部位(根、茎、叶)要接种两块板,大板五个样本,小板四个样本,即没有中间部位,剪样前确定需要几个样本,尽量多剪几个,防止下面的操作步骤中会有损失。剩余的标本收好放进冰箱,剪过、洗过剩余的扔掉;
(3)将剪好的样本按照植株的种类放入不同的离心管中,并注明植株的相关信息。
1。4。4灭菌
(1)将样本放入离心管内倒入适量70%的乙醇,拧紧瓶盖,用计时器计时一分钟,每过十秒晃动几次离心管,使样本充分灭菌;
(2)1分钟后,将离心管内的乙醇倒到废液容器内,倾倒时注意不要将样本倒出,若样本倒出或触碰到离心管以外的东西,弃去;
(3)在离心管内继续加入适量3%的次氯酸钠或4%的84,计时十分钟,每分钟晃动一下离心管,时间到时将液体倒出,同样注意不要将样本倒出或触碰到离心管以外的地方,倒出的样本不能重新放入到离心管内,应弃去;
(4)最后在离心管内倒入无菌水冲洗三次,步骤同上;
(5)冲洗结束后,将样本放在盖子准备下面的步骤。
注意:样本的表面灭菌及其重要,关乎到以下操作过程中的菌种收集,所以在灭菌时一定要严格操作,做到最好的灭菌效果。
1。4。5接种来,自,优.尔:论;文*网www.youerw.com +QQ752018766-
无菌操作台提前半小时打开内,将事先配置的固体PDA在微波炉里加热融化。融化时注意观察,当看见瓶内起白色放入泡泡是赶紧关掉微波炉,稍微冷却后晃动锥形瓶,动作要轻缓,防止用力过猛瓶盖喷出造成误伤,不停反复此动作,直至瓶内PDA变得清澈无沉淀即可,然后在无菌操作台进行倒平板,将灭菌的PDA倒入平板,倾倒时大概平板底面的三分之二,放在台面轻轻晃动至整个板面均匀分布,最后在操作台内直至冷却凝固。
为了方便记录,将每种植株用A、B、C、D进行命名,把平板平均分成四组分,将凝固的PDA平板口在酒精灯处灭菌,镊子在酒精灯上灭菌后夹取瓶盖的样本放入平板内,大板放五个,包括中间,小板放四个,每个板子都是一种植株的一个部位,最后在平板上写明名称、时间、样本序号等。
注意,掉落在操作台上的标本不能继续使用,每次夹取完一个植株时要进行酒精灯灭菌,稍微冷却后在夹取新的样本,防止烫坏样本。
来自香榧的青霉抑制菌分离纯化及鉴定(4):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_87731.html