乌苏里拟鲿主要依靠自然增殖和人工饲养繁殖来进行增殖，在1990年前，乌苏里拟鲿的自然产量在同科里只比黄颡鱼低，排在第二位[2]。随着生态环境的恶化，人类现代化和工业化的生活和生产活动等的影响，乌苏里拟鲿的自然产量已经显著降低，数额非常小，而乌苏里拟鲿又主要依靠自然生殖来繁衍后代，所以，现如今乌苏里拟鲿的种群面临枯竭，已经成为稀有鱼类[3]。总体而言，我国对乌苏里拟鲿研究非常少，已报道的主要有黑龙江水产研究所的任慕莲[4]、张觉民[5]、薛淑群和尹洪滨[6]，他们都对其生物学特性做了调查、分析和研究。黑龙江省现在已经将乌苏里拟鲿列为重点开发的优质土著鱼类品种，包括增加养殖和对其进行推广研究[2]。文献综述

生物所有的历史都记载在染色体上，染色体数目以及核型是细胞遗传学的基本内容，染色体的核型分析可以作为生物的一个特征。染色体研究中的基本方法包括染色体的核型分析[7]。分析染色体的核型, 是指分析染色体的形态、大小和数量等特征。对了解生物的遗传变异和探究它的发育机制起到基石的作用, 可以进一步的研究物种的基因组数，探讨物种起源、进化和种间关系，分析性别遗传的原理，鉴定多倍体育种和物种间杂交的机理[8]。本实验就乌苏里拟鲿的染色体核型进行分析，通过空气干燥法和吉姆萨染色法的操作，选取生物细胞分裂中期染色体分散状态比较好的细胞,进行显微镜观察并摄影。取清晰的底片放大出照片，对乌苏里拟鲿的染色体进行初步的核型分析以及研究，以期对乌苏里拟鲿的资源的保护利用和物种的演化研究具有一些意义。

2  材料与方法

2。1  材料

研究所用的乌苏里拟鲿自淮安市水产技术指导站购进，其体重为10-20g，体长为10-15cm，所采购鱼类健康，体表无损伤，在学院水产养殖室供氧养殖月余后用于染色体核型分析。

本实验所需试剂：

植物血球凝集素（PHA）：试验用材料产商为上海励瑞生物科技有限公司，取本品5mg溶于2。5ml 0。75%的生理盐水中作为母液，用前按照10ug/g鱼体质量的剂量稀释及取用。

    配制0。75%的生理盐水：称取氯化钠3。75g溶于500ml蒸馏水中，得到0。75%的生理盐水。

配制低渗液：称取氯化钾0。559g溶于100ml蒸馏水中，得到0。075mol/l的氯化钾低渗液。

配制注射用秋水仙素溶液：试验用秋水仙素产商为国药集团化学试剂有限公司，取事先避光放置于冰箱保存的秋水仙素5mg，溶于所配的50ml 0。75%生理盐水中，得到浓度为100μg/μl的实验用秋水仙素溶液，避光保存于4°冰箱中。

卡诺氏固定液：试验用材料产商为南京化学试剂股份有限公司，按甲醇：冰乙酸=3:1的体积比配置卡诺氏固定液，试验中现用现配，使用前预冷。

2。2  方法

2。2。1  PHA、秋水仙素注射

根据10 ug/g的鱼体质量的剂量向乌苏里拟鲿腹腔注射植物血球凝集素(PHA)溶液，饲养12h后在相同部位按相同剂量再次注射PHA，再次饲养12 h后在相同部位按照5ug/g鱼体质量的剂量向乌苏里拟鲿腹腔注射秋水仙素。注射时针头从鱼胸鳍下侧面插入，缓慢注射，针头不宜进入过深，防止伤害内脏，使实验鱼受伤而亡。继续饲养3。5-4h，若实验鱼生命体征良好则将其腮血管剪断，放血20-30分钟。

2。2。2  制备肾细胞悬液

将乌苏里拟鲿解剖，取出头肾组织，置于培养皿中，培养皿中盛有少量0。75％的等渗生理盐水，用镊子和剪刀去除结缔组织，于生理盐水中洗涤2-3次，去除其他组织，用手术剪及镊子将其充分剪碎，加入适量0。75％的生理盐水，静置10 分钟，吸取上层细胞悬液到5 ml离心管中。来`自+优-尔^论:文,网www.youerw.com +QQ752018766- 乌苏里拟鲿核型分析与研究(2):http://www.youerw.com/shengwu/lunwen_90547.html