2 材料与方法

2。1 材料与设备

2。1。1 材料和试剂

鱼类：小黄鱼，鲳鱼，青鱼，白鲑鱼，秋刀鱼；菌菇类：金针菇，茶树菇，香菇，平菇，白玉菇；绿菜类：菠菜，茼蒿，塔菜，生菜，小青菜；根茎类：土豆，紫薯，藕，山药，白萝卜等购于海湾乐汇购物广场。腺嘌呤（99%，上海蓝季生物），去离子水、称量纸、记号笔。

2。1。2 仪器和设备

紫外分光光度计（722型可见分光光度计，上海精科）、超声波提取仪(SCQ-5201H,山海声彦有限公司)、离心机（TDZ4A-WS）、恒温水浴锅（HHS，上海博迅实业有限公司医疗设备厂）、分析天平（AL204，梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司）、500mL烧杯、10mL离心管、移液枪（BIOHIT）、10mL容量瓶、电热恒温鼓风干燥箱（PHOT-9030，上海精宏实验设备有限公司）。

2。2 实验方法文献综述

2。2。1 嘌呤分析方法

使用超声提取的方法，料液比1:40提取食物中的嘌呤。采用紫外分光光度计在260nm下测吸光度A，再依据嘌呤标准曲线计算出食物中的嘌呤含量[22]。

使用超声波法不用额外加热，这样可以减少燃料的使用量, 溶剂用量少可以节约溶剂。紫外分光光度法操作过程不复杂、灵敏度很高。

2。2。2 标曲制备

选用腺嘌呤作为标准样品,按以下浓度制备标曲。称0。1g腺嘌呤标准品溶于10mL去离子水中，用移液器准确移取0。010，0。020，0。040，0。100，0。200mL嘌呤标准储备液[23]，分别置于10mL 容量瓶中。用蒸馏水稀释至刻度,配成嘌呤标准系列,用紫外分光光度计进行检测[24],以蒸馏水作空白对照,根据腺嘌呤在260 nm 波长处拥有特异吸收峰特性,确定检测波长为260 nm。以X 表示吸光度, Y表示腺嘌呤含量,计算回归方程。

2。2。3 样品初筛

样品用烘箱烘干计算水分。将样品切碎，按料液比1:40[26]加去离子水放入超声波提取仪中提取20min，提取液转移到离心管中1500r/min离心10min，最后用紫外分光光度计在波长260nm进行测量。每一类样品中挑选出嘌呤含量最高的一种样品，进行加工处理。（样品用烘箱烘干计算水分。）

2。2。4 室温水浸泡

取6份样品，每份10g，分别用室温水浸泡10，20，30，40，50，60min，再分别测量其吸光度，分析浸泡不同时间样品中嘌呤含量的变化。

2。2。5 水浴来;自]优Y尔E论L文W网www.youerw.com +QQ752018766-

取6份样品，每份10g，分别在60℃的水浴锅中进行水浴10，20，30，40，50，60min，再分别测量其吸光度，分析水浴不同时间样品中嘌呤含量的变化。

70℃和80℃的处理方法同60℃。

2。2。6 蒸

取4份样品，每份10g，分别蒸5，10，20，30min,再分别测量其吸光度，分析蒸不同时间样品中嘌呤含量的变化。

2。2。7 煮

取4份样品，每份10g，分别煮5，10，20，30min,再分别测量其吸光度，分析煮不同时间样品中嘌呤含量的变化。

2。2。8 炒

取3份样品，每份10g，分别炒1，2，3min,再分别测量其吸光度，分析炒不同时间样品中嘌呤含量的变化。

2。2。9 炸（鱼）

取3份样品，每份10g，分别炸1，2，3min,再分别测量其吸光度，分析炸不同时间样品中嘌呤含量的变化。