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    1.5 本课题研究内容和研究意义    5
    1.5.1 研究内容    5
    1.5.2  研究意义    6
    2 实验部分    7
    2.1  实验仪器与试剂    7
    2.1.1  实验仪器与材料    7
    2.1.2  实验试剂    7
    2.2  工艺流程    8
    2.2.1  硝酸纤文素膜的预处理    8
    2.2.2  胶体Au的制备    8
    2.2.4  胶体Au标记二抗    8
    2.2.5  试剂盒的组装    9
    2.2.6  一抗的包被    9
    2.2.7  封闭    9
    2.2.8  TNNI3K抗原浓度的检测    9
    2.2.9  灰度值的测定    9
    2.3  试剂盒工艺条件选择    10
    2.3.1  硝酸银浓度对银染的影响    10
    2.3.2  一抗浓度选择    10
    2.3.3  胶体Au标记二抗的最佳条件选择    10
    2.3.4  加入Au-二抗之后清洗次数对灰度的影响    10
    2.3.5  RE-Au微粒的银染效果    10
    2.3.6  RE-Au混合比例的确定    11
    2.4 表征    11
    2.4.1  胶体Au的UV-Vis吸收光谱的测定    11
    2.4.2  Au-二抗的UV-Vis吸收光谱和IR的测定    11
     
    2.4.3  TNNI3K浓度的检测试剂盒(Au)的IR的测定    11
    2.4.4  RE微粒的UV-Vis吸收光谱的测定    11
    2.4.5  RE-Au微粒的UV-Vis吸收光谱的测定    12
    3 结果与分析    13
    3.1  工艺条件选择    13
    3.1.1  硝酸银浓度的选择    13
    3.1.2  一抗浓度对灰度值的影响    13
    3.1.3  胶体金标记二抗条件的选择    14
    3.1.4  加入Au-二抗之后清洗次数对灰度的影响    15
       3.1.6  RE-Au微粒的银染效果    15
    3.1.7  RE-Au混合比例的确定    16
    3.2 表征    18
    3.2.1  胶体Au的UV-Vis吸收光谱    18
    3.2.2  Au-二抗的UV-Vis吸收光谱和IR    19
    3.2.3  TNNI3K浓度的检测试剂盒(Au)的IR    20
    3.2.4  RE微粒的UV-Vis吸收光谱    22
    3.2.5  RE-Au微粒的UV-Vis吸收光谱    23
    4 结论    25
    致谢    26
    参考文献    27
    1 引言
    1.1 免疫检测技术
    在医学研究中,通过免疫检测技术利用已知抗体检测未知抗原,在该方法中作为分析试剂的已知抗体可以是一种,也可以是多种,既可以定性的检测未知抗原,也可以定量的检测未知抗原。免疫检测技术基本原理是抗体和抗原之间的相互作用,关键技术是抗原和抗体之间反应的特异性和灵敏性[1]。
    免疫检测技术是一种广泛应用在生物分析检测领域的方法,最早被引入化学分析界,是在1959年美国物理学家Yallow和Berson,利用放射免疫检测法(Radioimmunoassay RIA)检测血清中的胰岛素的检测中[2]。此外免疫检测技术具有特异性强、操作相对简单、灵敏度高等优点,因此在环境卫生、食品安全及临床检测等领域中应用十分广泛。
    免疫检测技术分为两种:标记免疫分析检测技术和非标记分析免疫检测技术。标记免疫分析检测技术依据标记示踪物的不同,划分为酶免疫分析检测、放射免疫分析检测和其它免疫分析检测技术(荧光免疫检测技术、胶体金免疫检测技术和发光免疫检测技术等)。自二十世纪七十年代以来,很多灵敏度高的检测分析方法应用于临床免疫学检测,其中酶联免疫吸附法是最早使用以及应用最广的传统方法之一。随着免疫检测技术不断快速的发展,其已经成为一个多学科交叉的新型分析技术,结合其他的分析方法,形成很多种新的分析方法[3]。
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