金线莲作为兰科开唇兰属植物其主要含多糖类物质,其次是牛磺酸、强心甙类、酯类、生物碱、甾体,多种氨基酸,微量元素及无机元素等。[2]健康人服用之后有提高免疫力,增强人体对疾病的抵抗力,提高人体耐受力等,被福建台湾地区土著民所器重,用于滋补、强身健体。而在西医中,把物质剖析到个体,以个体的功用来说明一个纯“物质”的作用。
金线莲的成分被单一的分列出来,然后逐个动物实验,以证实这些物质的功用。第一类,类细胞传递物质,激素样或干扰素样反应,激活肌体功能。这部分功用体现在中医的“治疗肺热咳嗽,肺结核咯血,尿血,小儿惊风,肾炎水肿,风湿痹痛,糖尿病、急慢性肝炎、风湿性关节炎、肿瘤等疑难病症”。第二类,心脑血管疾病治疗,主要体现在降血脂,是有效成分进入体内后,能够激活细胞线粒体中的脂肪转移酶和血液中的胆固醇分解蛋白(商业机密,具体物质名称略,但相信行内人知道是哪一些物质)论文网。第三类,改善肠胃环境,调节肠胃微生物的作用。第四类,人体无法合成的一些小分子有机物,起到维生素样作用。[3]但是金线莲种子微小,并且由未成熟的胚及数层种皮细胞构成,自然萌发率和繁殖率都很低,近年来,随着对其药效学和临床应用研究的深入,对金线莲药用价值的认识进一步提高,野生金线莲资源也不断遭到破坏性采挖,以致于处于濒临灭绝之地。本研究旨在采用组织培养技术,提高金线莲的繁殖速率从而为解决金线莲种苗来源,提高金线莲人工栽培的效率,从而保护金线莲的野外资源,并且稳定市场供应。
1 材料与方法
1。1 材料与仪器
1。1。1 实验材料
金线莲幼体树株、无菌水、蔗糖、活性炭粉末、MS培养基、琼脂条、激素TDZ和NAA、蒸馏水、珍珠岩、景美植物培养土
1。1。2 实验仪器
陶瓷杯、玻璃棒、电子天平、量筒、移液枪、培养瓶、电炉、滤纸、高压灭菌锅、酒精灯。
1。2试验方法
1。2。1金线莲培养基的配置
称取活性炭粉末3g,MS培养基4。74克,琼脂条7g/L,蔗糖30g/L,之后用量筒获取1L的水并加入500微升的TDZ激素,同时把PH值控制在6。0并按此配方配置2L的金线莲培养基。之后将这2L的培养基液平均分成25份,分别倒入培养瓶中,然后裁剪滤纸包装后同培养基一起放入高压灭菌锅,在121℃,0。1~0。15 MPa条件下高温、高压灭菌20 min。
1。2。2金线莲幼苗及芽,茎块的获取
将数株无菌金线莲摆放在无菌超净台的滤纸上,并对金线莲进行分离切割,并分成数份茎块的金线莲并在无菌水中漂洗。
1。2。3金线莲茎块的接种
在无菌超净台上,将清洗过的无菌金线莲茎块平均接入25瓶金线莲茎块萌发培养基中,每瓶接种4~5块金线莲茎块。在25 ℃的环境下培养,先暗培养两天,之后进行光培养,每天进行光照14 h,光照强度控制在1500~2 000 lx。然后定期的观察、测量,统计污染率、幼苗株高。
1。2。4金线莲的组织培养文献综述
继代增殖分化培养基:基本培养基为4。74g/L MS,30g/L糖,7g/L琼脂条,添加500微升的TDZ激素,pH 6。0,在121℃,0。1~0。15 MPa条件下高温、高压灭菌20 min。培养温度为25 ℃,进行光培养,每天光照14 h,光照强度控制在1500~2 000 lx。然后定期的观察、测量,统计污染率、幼苗株高。在进行继代组织培养时每月进行一次共计三次的观察、测量,统计污染率、幼苗株高。