4。2 密度对卤虫孵化率的影响 13

4。3 光照强度对卤虫孵化率的影响 13

4。4 光照周期对卤虫孵化率的影响 14

参 考 文 献 15

致 谢 17

1。前言论文网

卤虫(Brine Shrimp)在民间称丰年虫，又称盐水虾，在分类学上属无甲目、盐水丰年虫科、卤虫属（Artemia）。是一种重要的水产动物的饵料和实验室的动物研究材料。关于卤虫的研究可追溯到1775年，而将其作为水产动物饵料的研究，则是从20世纪30年开始。Seale和Rollefsen于1933年先后将卤虫作为饵料的研究均获得了成功，自此卤虫作为水产动物的饵料而被国内外广泛研究。温度、盐度、pH值等对卤虫休眠卵孵化率的影响已有报道[1-4]。但密度和光照周期对卤虫孵化率的影响，几乎无人研究；而是为密度和光照周期对卤虫生长、繁殖的影响的研究，如：张闰生等[5]和黄旭雄等[6]分别探讨了密度、光照周期对卤虫繁殖的影响，以及廖永岩等[7]研究了密度对卤虫生长的影响。光照强度作为对卤虫孵化影响的一个重要的因子，国内外均已有报道，如：张强等[8]对巴里坤湖卤虫卵的研究，光强对孵化率没有影响，但会影响孵化的同步性；ASIL等[9]光照强度对卤虫孵化、生长参数的影响；不同品种的卤虫对光强的要求不同[10]；王忠良等[11]利用响应面法研究光强和盐度对卤虫卵孵化率的联合效应，指出光强和盐度对孵化率的一次效应、二次效应均的影响都极显著，但两者间无交互影响；张闰生等[12]采用正交实验发现温度、盐度、光照强度和pH对卤虫孵化均有极显著的影响，温度和光照间存在很强的交互作用。但是密度、光照强度与光照周期对卤虫孵化率的影响尚未见有报道，所以本实验选用这三个因子，利用响应面法，CCD中心复合设计实验，来探明这三个因子对孵化率的影响。响应面法和中心复合设计实验（CCD）不仅能减少实验次数、对因子建立模型，还能对实验结果进行优化找到最佳的实验因子组合并对实验结果进行预测，可为卤虫的实际培养、孵化提供理论依据。

2 材料与方法

2。1 材料

实验所用卤虫卵产地为天津市，经过观察该卤虫为行孤雌生殖的卤虫（Artemia parthenogentica of Tianjin）。适宜温度范围为26℃-28℃；盐度范围为10-35‰；pH值范围7。8-8。5；24小时以后收集。卤虫卵使用前从冰箱冷藏室中取出室温条件下解冻24小时，选取卵壳表面光滑无附着物且松散的休眠卵。

2。2 试验方法

2。2。1 预处理

用天平（FA2004型,上海舜宇恒平出品）分别称取0。1g、1。05g、2。0g解冻后的卤虫卵4份、9份、4份，倒入1000ml的烧杯中，加入曝气的自来水500ml，浸泡2h，触发卤虫卵孵化机制。

2。2。2 孵化液的配制

用天平称取食用盐（清真海藻碘食用盐，江苏省盐业集团有限责任公司专营）17份，分别置于装有1000ml的经过24h泵气后的自来水的1000ml烧杯中，使用手持式盐度计调节盐度至20‰，并用碳酸氢钠和盐酸调节pH至8。5。

2。2。3 去壳液的配制文献综述

按Sorgeloos[13]的方法配制去壳液,即每克卵需13ml的去壳液。以有效氯含量为10%的NaCIO的来算，每10克卵需要10%NaCIO 50ml、淡水80ml、NaOH1。3g,根据实验所用卤虫卵的质量计算出所需NaCIO、NaOH、淡水的量。

2。3 孵化

将预处理2h后的各份卤虫卵样品分别用孵化液冲置1000ml烧杯中，渐渐将孵化液加到1000ml刻度线，按照试验设计的光照强度与光照周期放入人工气候培养箱中（MGC-800HP，上海一恒出品）孵化，孵化过程中用增氧泵（YT-302C，森森集团股份有限公司出品）一直泵气使卤虫卵上下翻滚。孵化期间的温度为28℃，通过调节人工气候培养箱温度按键将温度设定；盐度为20‰；pH为8。5±0。03。试验所设置的光照强度通过灯管个数以及灯管与水面之间的距离来调节，并用照度计（AR813A，希玛公司出品) 来测定，光照周期通过人工气候培养箱的按键设定。