到目前为止，国内外对于辣椒疫病的生物防治均有较多的研究。 Lee等先接种 TMV辣椒菌株 ,再接种辣椒疫霉的游动抱子 , 发现辣椒疫病的严重度和病斑均小于对照 , 从接种叶片中分离到 PR1和 PR5蛋白 , 表明接种 TMV后诱发辣椒产生系统获得抗性 (SAR)[7] 。 Jubina等从印度不同辣椒产区分离根际细菌进行体内体外生物防治试验 , 发现在 194个菌株中 , 有 8个在室内可减少辣椒疫霉菌饱子的产生 , 田间试验表明这些根际细菌能有效地控制病害 , 辣椒死亡率仅为 43。5%, 而对照为 100%, 有 3种菌株施用 90d后还有很好的效果[8] 。Silvar 等[9]在辣椒植株上接种番茄枯萎病菌（Fusarium oxysporum f。 sp。 lycopersici，FOL）后再接种辣椒疫霉菌，结果发现，与对照相比，其茎秆和根中的病原菌含量存在差异， 被 FOL 诱导处理的辣椒叶片中未检测到病原菌。国内周成萍等报道 , 从海南五指山原始林区采集的土样中分离获得 1株对辣椒疫霉菌具强烈抑制作用的放线菌 WZ60菌株 , 田间表明 , WZ60对辣椒疫病具有 90%的防效 , 且防效持久[10] 。 严占勇等从辣椒根际土壤中分离出 293个分离物 , 通过平板对峙培养 , 筛选出 5个芽孢菌株;温室控病试验表明 , 芽孢菌 Bn130对辣椒疫病防治效果最好 , 达 64。7%[11] 。肖淑芹等［12］发现木霉菌株 TR39 对辣椒疫霉具有重寄生与营养竞争作用，抑制辣椒疫霉生长。涂璇等［13］筛选的 2 个放线菌菌株 0108 和 0110 对辣椒疫病的防治效果在 75% 以上。这些生防菌或其代谢产物，在辣椒根围形成了一定的屏障，改变了根围微生态环境，但根围微生态改变的意义尚未引起足够的重视。源C于H优J尔W论R文M网WwW.youeRw.com 原文+QQ752-018766

    微生物菌肥“宁盾”是由本项目组前期与南京农业大学联合开发研制，于2013年取得生物肥料正式登记证：微生物肥（2013）准字（1096）号）。在前期工作中，“宁盾”在防治辣椒土传病害中取得了较好的效果[14-15]。在宁盾研发过程针对不同土传病害和植物促生长等多个方面，课题组其他人员已经研究其多个方面的作用。在前期试验中，宁盾能防治根结线虫、疫病、青枯病等土传病害[16]，对大棚蔬菜连作障碍方面具有较好的缓解作用，同时还能增强作物抵抗冻害、干旱等胁迫[17]，并且在研究中发现“宁盾”的使用对田间病害的防治效果可以持续到下一茬种植（下一茬种植过程中即便不再施药，辣椒仍然生长良好，病害发生较轻）。

因此，本研究旨在检测“宁盾”在防治辣椒土传病害过程中，对辣椒根围细菌种类以及主要土壤养分的影响，为该微生物菌肥的进一步应用提供依据。

2  材料与方法

2。1  实验设计及土壤样品采集

本研究地点设在江苏省淮安市农业技术推广中心蔬菜园区，在辣椒移栽时利用本实验室现有微生物菌剂“宁盾”进行灌根处理，并在移栽后1、2、3个月时分别采集辣椒根围土壤进行检测。以未使用微生物菌剂的辣椒作为对照组，处理组和对照组实验小区随机分布，每个处理3次重复，每个重复小区面积3*2m2。处理组包含4个辣椒品种，分别为红优4号（TH），马六（TM），好农50（TA）和苏椒5号（TS），对照组为红优4号（CH）。

整个土壤采集过程采用三点取样法，每个小区选取间距1米辣椒植株三株，首先将植株拔出，轻轻抖动以去除粘附的大量土壤，再利用毛刷轻轻刷下紧贴在辣椒根部的根围土，三株辣椒样品混合在一起，装入塑封袋放在冰盒中带回实验室，样品前期处理后研磨过2mm筛。进行土壤总DNA 的提取、进行PCR-DGGE分析，部分置于阴凉通风处自然干燥至恒重，用作土壤理化性质检测。剩余的则置于-20℃冰箱保存备用。