安徽九华山植物内生真菌的分离及其抗菌活性的初步研究(2)
九华山位于安徽省池州市青阳县境内，西北接安庆市天柱山风景区，南接黄山风景区，是安徽省三大名山之一（黄山、九华山、天柱山），有着中国四大佛山的美誉。其境内平均海拔为600m以上，最高峰十王峰海拔达1342m。九华山土壤多为红壤，且土质肥沃，深度达40-80cm,温暖湿润的气候和得天的自然环境造就了其丰富的自然资源。据相关研究调查表明，九华山的药用植物达810种（包括种级一下的单位），药用动物约90种。且其覆盖面广，涉及低等到高等的药用动植物[5]。
当前细菌耐药性在全世界范围内日趋严重，成为了威胁人类健康的巨大杀手。这促使人们不断开发新的抗生素。而目前开发新抗生素主要有两种手段：一是化学合成或修饰已知的抗生素，二是从天然产物中寻找抑菌物质。过去人们常常从自然条件下独立生长的微生物如土壤微生物中寻找天然抗菌物质，而目前很难再从这些微生物中寻找到新的抗生素。内生真菌是生长在植物体内但对植物没有伤害的一类真菌。据文献报道，这类真菌是产生天然抗菌物质的一个重要来源[6,7]。九华山植物种类丰富，含有大量内生真菌，但其内生真菌的抑菌作用尚无系统研究，本课题将从九华山植物中分离内生真菌，并从中筛选出具有抑菌活性的菌株，为从九华山植物内生真菌中寻找抑菌物质提供基础数据。
1 材料
1.1 植物材料
植物的叶片和枝条样本采自安徽省池州市九华山。
1.2 供试指示菌
大肠杆菌（Escherichia coli）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus），以上菌种均为江苏师范大学药用植物生物技术重点实验室提供。
1.3供试培养基
马铃薯葡萄糖培养基（PDA固体）：马铃薯100g/L,葡萄糖7.5g/L，琼脂17g/L，pH自然
马铃薯葡糖糖培养基（PDA液体）：马铃薯100g/L,葡萄糖7.5g/L，pH自然
Luria-Bertani培养基（LB液体）：胰蛋白胨10g/L,酵母提取物5g/L，NaCl 10g/L,ph 7.0
1.4实验试剂
无菌水：用去离子水高温灭菌20min
70%乙醇：用无水乙醇加入无菌水配制而成
3.5%次氯酸钠溶液：用无菌水和次氯酸钠配制而成
下一篇：鱼源维隆气单胞菌的分离与药敏试验