摘要本研究以我国蓝藻水华中典型的微囊藻毒素MCLR为目标污染物，以两栖动物黑斑蛙为对象，采用体内污染模拟实验等方法，系统研究低剂量暴露条件下MCLR对两栖动物黑斑蛙的肝脏氧化损伤效应。本研究将黑斑蛙暴露在1μg/L浓度的 MCLR中0d、7d、14d，结果表明，超微结构观察发现黑斑蛙肝脏细胞发生氧化损伤，内质网和线粒体肿胀肿胀，嵴扩张，线粒体基质增加，核周染色质着边发现凋亡形态；活性氧（ROS）含量的上升；丙二醛（MDA）含量的上升；谷胱甘肽过氧化氢酶（GPx）活性的下降；谷胱甘肽（GSH）含量的下降。这些结果表明MC-LR会损坏黑斑蛙肝脏的抗氧化系统，诱导肝脏细胞损伤，造成肝毒性。本研究为微囊藻毒素MCLR诱导的两栖动物的肝脏氧化损伤效应提供了科学依据，进一步明确两栖动物体内的抗氧化系统，为两栖动物的保护提供科学理论基础。47235

Abstract In this study, MCLR, the most typical cyanobacterial toxins in blooming water bodies in China, is selected as the exposure pollutant and frog named Rana nigromaculatais acted as the exposure target. The systematic study is about oxidative damage in liver of Rana nigromaculata under low dose condition of MCLR exposure in vivo. In this study, the healthy adult frogs (Rana nigromaculata) were exposed to 1μg/L MCLR for 0, 7and14 days. Ultrastructure observation showed that MCLR induced oxidative damage in liver of Rana nigromaculata, including the swelling rough endoplasmic reticulum, swelling mitochondria, crest expansion, increased mitochondrial matrix, and perinuclear chromatin. Moreover, reactive oxygen species (ROS) in liver significantly increased and malondialdehyde (MDA) content accordingly significantly increased too. Activity of the antioxidative enzymes GPx decreased and glutathione (GSH) content also significantly decreased. All these results demonstrate that MC-LR could induce hepatotoxicity of liver damage via affecting the liver oxidative stress system. This study provides scientific basis to clarify antioxidant system of amphibians and further provides a scientific basis for the protection of amphibians.

毕业论文关键词：微囊藻毒素；黑斑蛙；肝脏；超微结构；氧化应激

Keywords：MCLR；Rana nigromaculata；liver；Ultrastructure Observation；Oxidative stress

目      录

1. 介绍 1

2.材料与方法 2

2.1 化学药品 2

2.2 动物和处理条件 2

2.3 电镜观察 2

2.4 活性氧含量的测量 3

2.5 MDA含量测定 3

2.6 GSH和GPx的测量 3

2.7 统计分析 3

3.结果与分析 3

3.1 肝细胞的超微结构观察 3

3.2 ROS和MDA分析 4

3.3 GPX和GSH分析 5

4.讨论 7

5.结论 8

参考文献 9

致    谢 10

1. 介绍

两栖类动物是湿地和陆地生物群落的重要组成部分，属于典型的环境生态安全指示物种。两栖动物衰减现象已成为一个严重的全球问题。Amphibian Web（2013）提供的数据表明近几十年来, 全球范围内的两栖类出现了较快的种群数量下降，其中有168个物种被认为已经灭绝，至少有2469（43%）个物种个体数量在不断较少，且灭绝和受到威胁的物种将就越来越多。中国拥有丰富的两栖类资源，共321种，其中236种是特有种。其中受威胁 ( 极危、濒危、易危) 种数为109 种。这说明在中国两栖类物种我国两栖类种群数量出现较快下降, 部分种类正面临灭顶之灾[1]。两栖类作为环境恶化的指示生物，寻找引起两栖类种群数量下降的原因，对于探讨全球变化对生命系统的影响以及保护人类生存发展和环境健康有着重要意义。其实，引起两栖类物种数量下降的原因有很多。除了生境破坏外，环境污染物的毒害作用是最直接的原因[2]。