摘要 ：木质纤维素是地球上丰富的可再生资源，但一般情况下，木质素难以被消化或破坏，漆酶和纤维素酶在木质素和纤维素的降解中分别起到了很大的作用。本论文的目的主要是为了筛选出高酶活的菌株，实验中采用一株产红色色素的木腐真菌进行研究，主要包括该真菌菌丝形态的鉴定以及对其产生的纤维素酶和漆酶活性进行研究。通过实验研究，初步鉴定该菌株为绯红密孔菌（Pycnoporus coccineus SP.）。相同条件下，发酵液培养2d，4d，6d，8d，10d分别取样得到的酶液检测出的酶活都有所不同，在2-8d时，漆酶的活力逐渐增大，第8d达到最大，此时的酶活是14.17U/L，8d-10d的时候，酶活逐渐下降。纤维素酶活力第4d达到第一个最大值，整个实验过程中，由于没有考虑到C、N源对实验的影响，导致纤维素酶的活力出现了双峰现象。60171

毕业论文关键词 ：菌丝鉴定，漆酶，纤维素酶，活性测定

Abstract：Lignocellulose is abundant renewable resources on earth，lignin difficult to be digested or destroy in general，laccase and cellulase played a great role in the degradation of lignin and cellulose，respectively . The purpose of this thesis is mainly to screen for strains with high laccase and/or cellulase enzyme activity by studying a wood rot fungi strain producing red pigment，mainly including identification of the fungal mycelial morphology and measure the cellulase and laccase activity . The preliminary date shows that the wood rot fungi strain is the crimson dense hole bacteria (Pycnoporus coccineus sp.). Under the same conditions，the cultured fermentation broth were sampled as rude enzyme at 2d，4d，6d，8d，10d and measured the laccase and cellulase activity，finding out that the enzyme activity changes over time. From 2-8d，laccase activity gradually increases，with laccase activity reaching the maximum 14.17U/L，from 8d-10d the laccase enzyme activity gradually decreased. Cellulase activity reaches the first maximum at d4. Throughout the experiment，because the effect of C，N sources is not considered，resulting in bimodal phenomena appeared in the cellulase activity.

Keywords：Identification of mycelium，Laccase，Cellulase，Determination of activity

1引言..5-6

1.1研究现状..5

1.2研究方法5-6

1.3研究目的及意义6

2材料方法6

2.1材料..6

2.2 培养基..6-7

2.3仪器与试剂7

2.4子实体观察7

2.5酶活的测定7

2.5.1酶液的制备..7

2.5.2漆酶活性的鉴定..8

2.5.3纤维素酶活性的鉴定8-9

3 实验结果...9

3.1子实体及菌丝的形态特征9

3.2漆酶的活性..9-10

3.3纤维素酶的活性.10-11

4讨论...12

结论13

参考文献14

致谢15

1 引言

1.1  研究现状

1.2研究方法

关于降解木质素的生物方法，大部分都集中在白腐真菌产生的酶系，其中最重要的降解酶有3种，包括锰依赖过氧化物酶（Manganese-dependent peroxidases，MnPs）、木质素过氧化物酶（Ligninperoxidase，Lips）和漆酶（Laccase，Lacs）[7-9]。漆酶是一种含铜的多酚氧化酶，它不仅温和而且环保，主要来源于生漆和真菌，可以降解木质素，并以此提高纤维素的酶解效率。漆酶的主要氧化底物是多酚芳环化及电离能  0.81VD的非酚环[10-12]，本实验中采用ABTS法来测定漆酶的活力。

纤维素的酶解需要纤维素酶的参与，纤维素酶是一种多组分的酶，它主要由3类组成，包括内切-β-1，4-葡聚糖酶；外切葡聚糖酶；β-葡萄糖苷酶。目前普遍认为纤维素的酶解是由这三种酶共同参与、相互合作完成的，首先由内切-β-1，4-葡聚糖酶在纤维素聚合物内部的非结晶部位进行切割，由此产生新的末端，然后由外切葡聚糖酶从纤维素二糖的末端进行水解，最后由β-葡萄糖苷酶将纤维二糖彻底水解变成葡萄糖。本实验中采用CMC分解法测定纤维素酶的活性。