1。1 十大功劳的研究进展
1。1。1 药理作用
(1)抑菌作用:25%阔叶十大功劳叶水煎剂再体外对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌有轻度抑制作用[4]。
(2)对平滑肌影响:十大功劳叶中提出的一些生物碱课引起短暂或轻度的血压下降。其降压作用与中枢无关,也不受阿托品的影响,但能抑制肾上腺素的升压作用[5]。
(3)抗癌作用:阔叶十大功劳用噬菌体法筛选,证实有抗噬菌体活性作用,揭示对肿瘤细胞有抑制活性的作用[6]。
1。1。2 功效主治
(1)养阴清热:十大功劳叶,性味苦凉,可养阴润肺,清热泻火。多用于虚劳内热,湿病发热等症[7]。
(2)润肺止咳:邪热留恋,病久津伤,肺失濡养,干咳痰少,略之不易,痰中带血,甚或潮热,盗汗,舌红少苔,脉来细数,此为肺虚有热,虚火灼津之象[8]。用十大功劳叶养阴润肺,清透虚热,水足热去,咳嗽可止[9]。
(3)清热解毒:本品苦凉,苦以泻邪,凉能退热,有清热解毒之功,用治湿热痢疾,目赤肿痛,风火牙痛多有良效[10]。
1。2 乌苏酸的研究进展
天然化合物乌苏酸广泛存在于白然界的多种植物中,具有活血、散癖、止痛、保肝等功效。现代药理研究发现,乌苏酸不仅毒性低、副作用小,而且具有广泛的生物活性,尤其在抗肿瘤、抗氧化、抗炎方面效果明显,因而备受国内外学者关注[10]。
2 实验方法
2。1 材料
十大功劳叶
2。2 试剂与耗材
乙醇、甲醇、蒸馏水、正丁醇、正己烷、乙酸、硫酸、硅胶板、毛细管。
2。3 主要仪器设备
SY-2000旋转蒸发器、KQ-500B型超声波清洗器、Waters1695高效液相色谱仪、Bruker AV-600核磁共振波谱仪。
2。4 试验方法
化合物分离纯化的方法主要有溶剂萃取法、柱色谱法、薄层色谱法、制备型高效液相色谱法等,以溶剂萃取法、柱色谱法、高效液相色谱法等使用较多[11]。柱色谱法主要包括大孔树脂柱色谱、硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱等[11]。论文网
本实验采用溶剂萃取法、葡聚糖凝胶柱色谱法以及高效液相色谱法等多种方法综合使用来分离十大功劳叶中的化合物并进行深入研究。
2。4。1 溶剂萃取法
溶剂萃取是重要的传质单元操作,其基本原理是通过溶质再两种互不相溶(或部分互溶)的液相之间分配不同的性质来实现液体混合物溶质之间的分离或提纯,并且溶剂萃取法具有选择性高、分离效果好、有利于连续化大规模生产的优点[12,13]。其中,超声萃取技术是由溶剂萃取技术与超声波技术结合形成的新技术,超声场的存在提高了溶剂萃取的效率[14,15]。本研究采用超声萃取技术来进行萃取实验。
2。4。1。1 预处理
实验步骤如下:
(1)将阴干粉碎的十大功劳叶与乙醇按1:20的比例混合,并将其放在超声混合机器中超声提取。
(2)将混合完全的十大功劳酒精溶液用纱布过滤,并将滤液进行真空抽滤。
(3)将抽滤过的溶液加至旋转蒸发器上蒸发浓缩,回收浓溶液即十大功劳叶提取物,将挥发出来的酒精废液加至之前残留的十大功劳残渣中,再不断重复步骤(3)。
此实验过程需要多次重复,从而达到充分提取的过程,直至十大功劳叶残渣与乙醇混合后的液体颜色变浅,即十大功劳叶中实验所需要的物质被充分提取出,而回收的十大功劳浓缩液备用。
2。4。1。2 萃取
实验步骤如下: