菜单
  

    待提取的铁蛋白液足够多的量时,一部分进行铁蛋白电泳纯度分析和氨基酸组成测定。另一部分则用冷冻干燥机进行冷冻,干燥获得粗铁蛋白固体粉末,待加工功能试验需用。

    2.3.2大豆铁蛋白的纯度分析

    参照Laemmli方法(1970)对提取的粗铁蛋白质溶液进行Native和SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳[9~10]。具体方法:

    Native-PAGE凝胶浓度为4-20%梯度胶,电泳缓冲液为Tris-HCl(0.025 M, pH 8.3);样品缓冲溶液中含有25%甘油,12.5% 0.5 M Tris –HCl pH 6.8及1%溴酚兰,每孔点样15 μL,Marker 6 μL,在4 ℃、25 V条件下进行电泳13 h。

    SDS-PAGE凝胶浓度为15%,电泳缓冲液为Tris-HCl(0.025 M, pH 8.3, 10% SDS);样品缓冲溶液中含有25%甘油,12.5% 0.5 M Tris –HCl pH 6.8,2 % SDS,1%溴酚兰和5%β-巯基乙醇,每孔点样15 μL,Marker 6 μL,充分混合后在95℃的水浴中保持5 min,然后在常温下下进行电泳。

    胶板大小为80 mm(W)×73 mm(H)× 0.75 mm(T)。电泳结束后用考马斯亮蓝(CBB)R-250 染色法进行染色(朱厚础,1999)。

    Native-PAGE电泳蛋白质Marker为:甲状腺球蛋白(669 kDa); 马脾铁蛋白(440 kDa);过氧化氢酶(232 kDa);乳酸脱氢酶(140 kDa);牛血清清蛋白(66 kDa)。

    SDS-PAGE电泳蛋白质Marker为:磷酸化酶B(97.4 kDa);牛血清清蛋白(66.2 kDa);兔肌动蛋白(43 kDa);牛碳酸酐酶(31 kDa);胰酶抑制剂(20.1 kDa);溶菌酶(14.4 kDa)

  1. 上一篇:植物提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌效果的研究
  2. 下一篇:多酚对油炸食品中丙烯酰胺产生的影响
  1. 大豆泡芙的研制+文献综述

  2. 葡萄(Vitis vinifera L.)籽蛋白的生化组成分析

  3. 茶籽蛋白的提取及体外抗氧化活性研究

  4. 玉米淀粉魔芋胶大豆分离...

  5. 鲜食大豆籽粒硬度关键组...

  6. 乳酸菌发酵大豆蛋白特性初探

  7. 枸杞蜂花粉糖蛋白的提取与分离纯化

  8. 上市公司股权结构对经营绩效的影响研究

  9. 江苏省某高中学生体质现状的调查研究

  10. 巴金《激流三部曲》高觉新的悲剧命运

  11. g-C3N4光催化剂的制备和光催化性能研究

  12. NFC协议物理层的软件实现+文献综述

  13. 现代简约美式风格在室内家装中的运用

  14. 浅析中国古代宗法制度

  15. 高警觉工作人群的元情绪...

  16. 中国传统元素在游戏角色...

  17. C++最短路径算法研究和程序设计

  

About

优尔论文网手机版...

主页:http://www.youerw.com

关闭返回