Keywords: seicin;hydrogel;scaffold;gamma-irradiation

目  录

第一章   绪论 1

1。1组织工程 1

1。2水凝胶 2

1。3生物支架 2

1。4丝胶蛋白 2

1。4。1丝胶蛋白的组成 3

1。4。2丝胶蛋白的生物活性 3

1。4。3丝胶蛋白的应用 4

1。4。4丝胶蛋白的分离方法 6

1。5材料除菌 7

1。5。1酒精灭菌法 7

1。5。2湿热灭菌法 8

1。5。3环氧乙烷（EtO）灭菌法 8

1。5。4紫外线照射灭菌法 8

1。5。5 Co-60 γ射线辐照灭菌 8

1。5。6其他灭菌技术 9

1。6立题依据 9

第二章   材料与方法 10

2。1实验材料与试剂 10

2。2实验仪器 11

2。3实验方法 11

2。3。1透析袋的预处理 11

2。3。2丝胶蛋白的提取 12

2。3。3交联制备水凝胶/冻干支架 12

2。3。4 γ射线辐照灭菌 12

2。3。5溶解率 13

2。3。6 SDS-PAGE凝胶电泳 13

2。3。7丝胶支架膨胀率的测定 15

2。3。8丝胶支架孔隙率的测定 16

2。3。9 FTIR 16

第三章   实验结果与讨论 17

3。1辐照灭菌除菌效果 17

3。2丝胶液、水凝胶样品 18

3。3辐照灭菌对丝胶蛋白蛋白分子量的影响 19

3。4辐照灭菌对丝胶蛋白二级结构的影响 20

3。5辐照灭菌对蚕茧溶解率的影响 23

3。6辐照灭菌对孔隙率的影响 24

3。7辐照灭菌对水凝胶冻干支架膨胀动力学的影响 25

结 论 27

致 谢 28

参 考 文 献 29

第一章   绪论

1。1组织工程

组织工程起源于20世界80年代，是一门新兴学科，目前应用于医疗、美容等行业[1]。器官或组织的缺损极大地危害着人体的健康，但这样的患者屡见不鲜，于是造就了组织工程学的兴起。组织工程为缺损的器官和组织提供相对廉价的替代物，如皮肤、肌肉、胰脏、肾脏、肝脏、骨科、人工血管等[2]。目前组织缺损或器官功能丧失的治疗方案有移植术、手术重建和人工假体等治疗方法。

如今，器官移植供体极度缺乏，组织工程的发展为需要各类器官的患者带来了福音。组织工程的技术主要是可以模拟出生物体内环境，构成由细胞、组织工程材料和生物活性分子组成的三维复合体，可以修复甚至代替组织或器官。构建这些代替物所使用的材料也是组织工程的一个重要的研究领域，其中生物支架是为种子细胞的粘附生长、增殖、凋亡等提供场地，生物支架的性能非常重要，影响着组织器官的最终形成。但目前的组织工程支架不利于细胞核组织的生长，获得性能良好的组织工程支架材料成为了研究热点[3]。