1  材料与方法

1。1 试验材料

    供试的180份材料和RILs群体是来自不同地区的大麦种质，引自杭州师范大学生命与环境科学学院。

1。2 培养方法 

1。2。1溶液配置

1）配置CaCl2母液：用电子天平称取55。5gCaCl2粉末，用量筒取0。5L蒸馏水，将CaCl2粉末完全溶解在蒸馏水中，配置成1。0M/L CaCl2溶液（CaCl2母液）。

2）配置 CaCl2溶液：取适量CaCl2母液，用蒸馏水稀释成1。0mM/L CaCl2溶液，并且用pH计（滴加适当浓度的盐酸）将CaCl2溶液的pH调到pH=5。0。

3）配置AlCl3溶液：用电子天平称取适量AlCl3粉末，用1。0mM/L CaCl2溶液分别配置5µmol/L ，10µmol/L，15µmol/L，20µmol/L，25µmol/L，30µmol/L，35µmol/L，40µmol/L，45µmol/L，50µmol/LAlCl3溶液，并且用pH计（滴加适当浓度的盐酸）将AlCl3溶液的pH调到pH=5。0（注意当调pH时，盐酸过多导致pH<5时，不能用碱溶液调回pH，应需取AlCl3溶液重新调pH）。

1。2。2大麦种子的消毒及发芽培养 论文网

（1）配制消毒水：取20ml30%的双氧水加蒸馏水定容至200ml，待用。

（2）培养皿的处理：将培养皿用蒸馏水清洗干净，自然晾干。

（3）湿润滤纸：剪适宜大小的滤纸，每个培养皿中放入一张滤纸，加入适宜水至润湿滤纸即可。

（4）培养种子：取每种大麦种子约 15~20粒，表面用 3%双氧水消毒约 3分钟左右后用蒸馏水冲洗3遍，滤干后用镊子转移至有湿润滤纸的有盖培养皿中。一次实验取8个大麦品种，按照编号重复上述步骤，待完成后置于22-24℃下黑暗培养24h。

（5）光照培养：把经24h黑暗培养后发芽的种子，每种共取10粒转移到1。5L规格的塑料容器内（含1。0mM/L CaCl2溶液（pH=5。0））的纱网上，完成后置于25℃的自然光照下继续培养3天，每天更换1。0mM/L CaCl2溶液（pH=5。0）。

1。2。3  计算根相对伸长量 

    （1） CaCl2溶液培养后测根长：用尺子测量在25℃的自然光照下培养3天后的根长，测量时注意根需要伸直测量，而后记录数据。

    （2）Al胁迫培养：第四天，把发芽的种子每品种各取5粒分别放在1。0mM/L CaCl2溶液（pH=5。0）中，Al胁迫下(10种不同浓度梯度的AlCl3溶液（pH=5。0））培养24h。

（3）AlCl3溶液培养后测根长：用尺子测量培养24h后的根长，测量时注意根需要伸直测量，而后记录数据。

（4）计算：用根的相对伸长量=Al处理后的根伸长/未经Al处理时的伸长×处理时的伸长来表示Al的抗性。

（5）重复上述实验3次，选出最适宜铝胁迫实验的AlCl3溶液浓度为15µmol/L 。文献综述

（6）以180种大麦品种和RILs群体为材料，重复上述实验1。2。2大麦种子的消毒及发芽培养 步骤（1）--（5），实验1。2。3计算根相对伸长量 步骤（1）--（4）（其中实验1。2。3计算根相对伸长量 步骤（2）中Al胁迫培养中的AlCl3溶液浓度为15µmol/L 即可）。

1。3 QTL定位与分析

所用遗传图谱由本实验室利用GP与H602构建的137份F8代重组自交系构建。由119对SSR分子标记组成，覆盖了大麦7条染色体；该图谱覆盖基因组2239。2cM，标记间平均距离为18。98cM。每条染色体标记数在10-27个，平均每条染色体17个标记。以每个株系的相对根伸长量为耐Al毒的表型值，利用基于混合线性模型QTLNetwork2。0软件进行相关QTL定位分析。标记的P值小于0。005时，则认为该标记处存在1个与性状有关的QTL。QTL提出的原则命名。