摘要：本文研究了干柱柱层析紫外检测装置。目的：根据紫外反射光强度的变化确定干柱柱层析分离后各组分的位置分布。方法：紫外检测法。实验对象：吸附在柱层析用硅胶上的有色甲基橙、对紫外无吸收且无色的蔗糖和对紫外有吸收且无色的色氨酸。结果：该装置对不同实验对象的测量数值不同。结论：该检测装置可靠、可行。42681

毕业论文关键词：紫外检测、干柱柱层析、硅胶、蔗糖、色氨酸、甲基橙

Study on dry column chromatography with UV detection method 

Abstract: This paper introduces the a dry column chromatography ultraviolet  device. Objective: to determine the position of the components of the dry column chromatography with the change of the light intensity of the ultraviolet light. Method: UV detection. Subjects:colored orange, colorless sucrose which not adsorb ultraviolet and colorless tryptophan which adsorb ultraviolet adsorbed in the silica of the column chromatography. Results: the numerical value of the device is different from different experimental objects. Conclusion: the detection device is reliable and feasible.

Keyword: UV detection, dry column chromatography, silica gel, sucrose, tryptophan，methyl orange

1. 前言

柱色谱法是将固定相装在柱内，使样品随流动相沿一个方向移动而达到分离的方法。常用的吸附剂填装有干法和湿法两种。湿法装柱的优点是填装紧密均匀，缺点是对溶剂选择性高，应用范围小,消耗的溶剂多，分离时间长。干法装柱的优点是操作简单，可以直接上样，分离时间短，缺点是不易装均匀，容易在填料过程中产生气泡，影响柱效。通过湿柱和干柱的相比，干柱适用范围广，几乎可以分离任何混合物质，而且操作简单、分离效果好，符合绿色化学的理念。

由上所述，我们采用干法装柱。常压装柱容易在填料中间产生气泡，影响柱效，因此我们采用低压装柱的方法来避免填料时气泡的产生。低压装柱操作简单，装满柱层析用硅胶后，抽真空，压紧，使装成的柱子既密实、又均匀。由于采用了减压抽滤的原理，大大加快了洗脱的速度，提高了效率[1]。

1965年首次报导了干柱层析法，1967年又报导了其改进的方法[2]。1983年报导了启开式分级转移干柱层析法[9-10]，1984年报导了低压干柱层析[11-12]，1990年对干柱层析法做了一点改进[13]，1992年报导了组合式干柱层析法，它是一种用于有机混合物层析分离的装置，由可拆联接在一起的多个柱体节、一个柱底节、一个漏斗和一个位于柱底节底部的滤板组成[14-15]。一般干柱层析法用的是玻璃柱、尼龙柱、塑料薄膜柱和钢柱。玻璃柱和尼龙柱在层析完毕后，必须将玻璃柱分段切割，才能取到不同段层的填充剂，操作不便，且玻璃柱和尼龙柱只能使用一次的问题；尼龙柱、塑料薄膜柱由于有些有机溶剂对其有一定的腐蚀性的问题[14-15]。目前最新最简易的组合式干柱层析法是用分段式钢柱,解决了一般干柱层析法存在的问题。虽然组合式干柱法操作简单、柱子可重复利用，但是此方法在进行展开时浪费展开剂，对物质在柱中的分布位置很难确定。 

干柱柱层析实验中，常用的有玻璃柱、尼龙柱和钢柱。玻璃柱易碎，尼龙柱易腐蚀且不能重复利用。因此，我们采用钢柱，但是钢柱在分离物质后难以确定各组分的位置。不同物质对紫外吸收强度不同，根据这一原理，进而我们研制了紫外检测装置，将研制的紫外检测装置应用到干柱柱层析装置上，它可以通过紫外照射柱层析用硅胶的表面，干柱柱层析分离后根据反射光强度的变化确定各组分的位置。在干柱上分离混合物时，在柱的顶端加入展开剂，当溶剂到达柱的底端时，就停止展开（不用将展开剂一遍又一遍的过柱），然后从下往上将柱中物质缓慢推出，一层一层切割，切割下的每层物质，在紫外下检测，通过光电转化器，将紫外反射光强度的变化转变成电信号的变化，根据显示屏数字的变化，确定各组分。将研制的紫外检测装置应用到干柱柱层析装置上，使得实验操作简易，提高了效率且柱子可重复利用。