当今由于提取技术的发展,对于黄酮的提取工艺也有了更深更广的研究,黄酮的提取方法也是层出不穷,对于从植物中黄酮类化合物的主要提取方法有很多种,例如:有机溶剂提取法、微波提取法、超临界CO2萃取法、超声波辅助提取法、酶浸渍萃取法。其中各种方法都有自身的优劣,如超临界萃取法速度快、操作简单,产品无溶剂残留;而超声波辅助提取无需加热,对有效成分具有保护作用。国内外提取分离黄酮类化合物方面,有很多高新技术的应用:例如超微粉碎技术、电磁技术、热反应技术、干燥技术、生物技术、微胶囊包埋技术、膜分离技术、超临界萃取技术以及多种技术的组合,这些组合为黄酮类化合物的提取、分离、纯化、分析、鉴定等提供了更为快速准确的实验方法和新的手段思路。分离纯化的方法有柱层析法、薄层层析法、高效液相色谱法、纸层析法、超临界流体分离法、大孔树脂吸附法、液滴逆流层析法、梯度pH值萃取法、金属试剂络合沉淀法、膜分离法等[4]。34633
(1) 酶法提取
酶解法适用于被细胞壁包围的黄酮类物质,利用酶反应的高度专一性,破坏细胞壁,使其中的黄酮类化合物释放出来。
(2)微波提取法
微波提取是利用不同结构的物质在微波场中吸收微波能力的差异,使基体物质中的某些区域或提取体系中的某些组分被选择性加热,从而使被提取物质从基体或体系中分离,进入介电常数较小,微波吸收能力相对差的提取剂。这种方法的优点是对提取物具有较高的选择性、提取率高、提取速度快、溶剂用量少、安全、节能、设备简单。论文网
(3) 超声波提取法
用超声波提取法提取黄酮类物质,是目前比较新的方法。原理是利用超声波在液体中的空化作用加速植物有效成分的浸出提取,另外,还利用其次效应,如机械振动、扩散、击碎等,使其加速被提取成分的扩散、释放。超声波提取法具有设备简单,操作方便,提取时间短,产率高,无需加热,同时有利于保护热不稳定成分,省时,节能,提取率高的优点。
(4)浸取法
浸取法是利用“相似相溶”的原理,主要采用不同浓度乙醇-水溶剂,以黄芩苷浸取率为指标,考察了不同温度、不同浸取剂浓度、浸取时间和搅拌速度对黄芩苷浸出率的影响,期望获得高浸取率的黄酮类化合物。传统的浸取工艺中包含煎煮法、乙醇浸取法等。
(5)双水相提取法
双水相提取技术是瑞典Per Albersson首先发现并研究的一种技术,双水相萃取法属于液- 液萃取,当物质进入双水相体系后,由于表面性质、电荷作用和各种力的作用,溶液环境的影响,其在上、下相中的浓度不同,即各成分在两相间选择性分配,从而达到萃取的目的。由于双水相体系分相快、使用温度低、容易操作、无污染、提取率高,因此成为黄酮化合物富集分离的一种有效方法。
(6)半仿生提取法
半仿生提取法是将整体药物研究法与分子药物研究法相结合,模拟口服给药后药物经胃肠道转运的环境,为经消化道给药的中药制剂设计的一种新的提取工艺。这种提取方法的特点是可以提取和保留更多的有效成分,能缩短生产周期、降低成本。
(7)超临界流体萃取法
超临界流体萃取技术是利用超临界流体处于临界温度和临界压力以上,兼有气体和液体的双重特点,对物质具有良好的溶解能力,从而作溶剂进行萃取分离。可做超临界流体的物质很多,一般为低分子量的化合物,如CO2、C2H6、NH3、N2O 等。目前多采用CO2 做萃取剂,因为它具有密度大、溶解能力强、临界压力适中、临界温度接近常温、不影响萃取物的生理活性、无毒无、化学性质稳定、生产过程中容易回收、无环境污染、价格便宜等一系列优点。但单一的CO2作萃取剂只对低极性、亲脂性化合物有较强的溶解能力,对大多数极性较强的组分则不起作用,因此,在其中加入夹带剂,通过影响溶剂的密度和溶质与夹带剂分子间的作用力来影响溶质在二氧化碳流体中的溶解度和选择性。超临界流体萃取技术有许多传统分离技术不可比拟的优点:过程容易控制、达到平衡的时间短、萃取效率高、无有机溶剂残留、对热敏性物质不易破坏等。但它所需要的设备规模较大,技术要求高,投资大,安全操作要求高,难以用于较大规模的生产。
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