章银良等采用5L发酵罐,研究在高温、高渗或有毒物胁迫条件下对酿酒酵母海藻糖的积累,海藻糖质量分数由正常情况下的10% 分别提高13.3%、12.7%和14.8%,并认为大规模生产海藻糖最经济有效的方法是在酵母对数生长期提高温度至40℃[21]。
日本的K. Aisaka 和T. Masuda[22] 利用Catellatospora f erruginea 生产海藻糖,产率达70%,日本之素株式会社( Ajinomoto Co.Inc) 利用一种氨基酸生产菌已实现了工业化生产。
曾国驱等筛选出了一株球形牙孢杆菌( Bacillus sphaericus ) E42 菌株,以麦芽糖为碳源,发酵初始pH值为7.0,接种量为6%,30℃条件下培养48h,海藻糖产量在3.3g/L以上,该菌株还可以葡萄糖和蔗糖为碳源[23]。
李绩对诱变株L- 61采用流加摇瓶培养,在培养至11~ 12h时,提高pH值到6.2并添加15g/L NaCl,继续培养到15h,酵母海藻糖质量分数平均达23.1% ,海藻糖体积收率为9.6g/ L,对糖质量得率13.29%[24]。
日本旭化成工业株式会社( Asahi Chemical Industry Co. Ltd. )用灰树花生产海藻糖,以土豆6%,麸皮浸汁20%,葡萄糖1%为培养基(质量分数),25 ℃下培养,37.5℃处理灰树花菌丝体获得了较高海藻糖含量[25]。
王兰等对面包酵母BY- 11从营养饥饿入手,仅供给适量的碳源及少量微量元素和文生素,并严格限制氮源,以3g/L(干计)接种量,36-37℃振荡培养3h,可使酵母积累海藻糖达0.96g/L,并在培养基中添加110%-115%的NaCl 以增加渗透压,大大提高了海藻糖含量,为工业化生产提供了可行性[26]。
张丽杰等人在对实验室保藏菌种Saccharomyces cerevisiae HY01 优化前的摇瓶发酵观察的基础上,采用单因子与响应曲面相结合的实验设计方法研究了酿酒酵母培养基中的初始葡萄糖浓度、无机氮源硫酸铵浓度、酵母浸出粉浓度、碳源与无机氮源的交互作用以及无机盐和微量元素浓度对海藻糖积累的影响。实验证明碳氮源交互作用明显,并得到了以上各因素的最优值,即初始葡萄糖浓度为20g/L,硫酸铵浓度为4.5g/L,酵母浸出粉浓度为5g/L,微量元素溶液5.0ml/L;硫酸镁0.3g/L;磷酸氢二钠3.67g/L;磷酸二氢钾0.76g/L时,酿酒酵母中海藻糖的干重含量可到达14.74%,比优化前海藻糖的干重含量12.24%提高了20.41%[27]。
A.O.Joseph等对酵母Saccharomyces uvarum 细胞添加体积分数10%的乙醇休克和37℃热休克,海藻糖质量分数由21℃时的8.24 mg/g分别提高到11.77mg/g和22.47mg/g。在发酵过程中,严格控制流加的碳氮比,在末期适当提高温度和减少通风量,使酵母呈“饥饿”状态2-3 h,可使海藻糖质量分数增加到15% -16%( 干计) 或更高
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