幽门螺旋杆菌是一种常见的具有慢性和持久性等特点的疾病,其感染范围极为广泛,遍布全世界,对各个年龄层的人都有很高的感染率。其导致的人类疾病有胃功能性消化不良,人体血红细胞变化,女性健康问题甚至糖尿病等等。HP感染是慢性胃炎的主要病因,并在消化性溃疡的复发中起主要作用[1]。因此,在医学界,生物学界,化学界的从事人员在检测人体中的幽门螺旋杆菌的领域付出了很多的心血。
目前已有很多成熟、便捷、效果较好的商品化H。pylori血清抗体检测试剂或试剂盒,所用技术有酶联免疫、化学发光酶免疫、胶体金免疫、免疫印迹等,所用抗原有重组蛋白、化学合成多肽等,步骤有一步的、多步的,功能有定性的、定量的[2]。其中,胶体金免疫层析技术在快速检测幽门螺旋杆菌方面拥有很大的优势。因此,研究如何高效准确地利用胶体金法检测幽门螺旋杆菌有了非常重要的实验意义和实践意义。
1。2主要内容
1。2。1幽门螺旋杆菌感染现状与分布
幽门螺旋杆菌又称HP。HP含有大量尿素酶,生长繁殖在胃粘膜与粘膜之间,分解尿素生成氨,在菌体周围形成碱性环境,中和胃酸的杀菌作用而在胃酸中存活[3]。幽门螺旋杆菌感染的临床过程是这样的:幽门螺旋杆菌如同普通的传染病一样是通过口腔进入的,通过口腔再进入胃粘膜定居感染。经过几周或者几个月,幽门螺旋杆菌开始慢慢感染人体,引发胃消化功能不畅。如果在此期间,人体不注意卫生且没有进行及时诊察,细菌就会进一步侵蚀人体胃粘膜,引发胃溃疡,甚至是胃癌。有医学家表示,幽门螺旋杆菌感染使胃癌的发生率大大提高,几率增加至2。7-12倍。也就是说,如果没有幽门螺旋杆菌的感染,至少可以避免35%-89%胃癌患者[4]。
HP的流行总趋势是,感染率与社会经济、居住和清洁卫生等状况以及受教育程度密切相关,发展中国家(>80%)高于发达国家(<40%),穷人高于富人[5]。幽门螺旋杆菌是后天传染的。现在公认的传播方式是口口相传,粪口传播。也就是说,如果一个人被幽门螺旋杆菌感染了,那么他的唾液中以及粪便中都会出现幽门螺旋杆菌。而且,一个家庭中,如果一个成员被幽门螺旋杆菌感染,那么家庭其他成员也会渐渐被感染。作为发展中国家,我们更应该发展幽门螺旋杆菌的医疗诊断方法。
1。2。2胶体金免疫层析技术的原理论文网
免疫胶体金技术有许多种, 目前医学检验中应用的免疫胶体金快速诊断技术主要有两种:胶体金快速免疫层析法和快速斑点免疫金渗滤法[6]。由于胶体金快速免疫层析技术具有方便快捷,灵敏度好,准确率高,不需要任何设备,方便快捷等优点,在医疗界被广泛应用。
胶体金快速免疫层析法是在世纪90年代国外兴起的一种诊断方法,目前,在国内的应用率也不是很广泛。其基本原理是将抗原/抗体固定在硝酸纤维素膜的T线上,当NC膜的一端与血清,血浆,全血或者尿液等等接触时。由于毛细管作用,试样会沿NC膜继续往上移动,当样品与抗原或抗体接触并发生免疫反应,此时,金标/乳胶结合物使之发生显色,这就是诊断的最终效果。胶体金是由氯金酸(HAuCl4 )在还原剂如白磷 、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下, 聚合成为特定大小的金颗粒, 并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态[7]。因此胶体金免疫层析技术就是利用胶体金与样品结合,使之显色,从而判断特异性反应是否发生。
目前,胶体金免疫层析技术的常用方法有双抗夹心法(双抗原测抗体、双抗体测抗原),竞争法,间接法。近年来,胶体金免疫层析技术不断发展,不仅在妇女健康,传染病,毒品检测等方面都有广泛应用,还实现了多项目检测的试剂盒。