槲皮素对血管内皮细胞的影响(2)

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4 讨论 16

参考文献 17

致谢 19

1 绪论

1.1血管退行性疾病

血管退行性疾病，例如动脉粥样硬化病、冠心病、高血压等疾病已经成为当今社会的重大疾病，其大大危害了人类的健康。其中，动脉粥样硬化病可以引发心肌梗塞、脑梗塞等非常严重的疾病。由于人民生活水平的不断提高以及近年来人们饮食习惯的改变，动脉粥样硬化病已经成为致死率较高的疾病之一。研究清楚血管退行性疾病的发病机制将为临床治疗该病提供有效的理论依据。

1.2糖尿病与血管退行性疾病的关联

糖尿病和血管退行性疾病有很大的关联，其中一种就是糖尿病可能会导致大血管病变。这种病变的专业名称是指冠状动脉、主动脉、脑基底动脉、肾动脉及周围动脉等动脉粥样硬化。将糖尿病人群和非糖尿病人群比较，在前者中患有动脉粥样硬化症的几率比较高，同时，在患病人群中，如果患者的岁数比较年轻，他们的病情治疗也比较快。而那些病情比较严重、致死率比较高的糖尿病患者中，有百分之七十到百分之八十的死于大血管病变。但是它的发病机制以及大血管病变与糖尿病的代谢紊乱之间的联系还不是很清楚。导致动脉粥样硬化症的某些因素，例如体重超重、高血压、高血糖、高血脂等，在人群中发生的概率比较高。糖尿病性的大血管病变的主要原因是在大血管中动脉粥样硬化现象严重，动脉壁的中层也硬化，动脉内膜的纤维增厚，导致大中血管的管腔变得狭窄，所以动脉粥样硬化的本质是动脉粥样硬化闭塞，其主要的病理变化是动脉壁的中层硬化和动脉内膜的纤维增厚。

1.3内皮老化

由于血管退行性疾病的病因复杂，病症发展缓慢等原因，目前关于血管退行性疾病的发病机制，研究比较缓慢。研究表明，伴随着人类年龄的增长，血管相关的疾病发病率显著增加，这就表明了细胞老化在血管退行性疾病的发病过程中具有重要作用。众所周知，动脉血管中富含弹性纤维、平滑肌和血管内皮细胞。其中，血管内皮细胞附着于血管管壁上，是最先接触血液的细胞屏障，其功能紊乱是细胞发生老化的关键步骤[1]。老化的内皮细胞生成一氧化氮(NO)和环前列腺素的能力有所下降[2,3]，但是能够生成更多的凝血恶烷、内皮素-1和活性氧(ROS)，导致内皮的血管舒张和抗血栓能力下降[4,5]。除此之外，老化的内皮细胞能够分泌更多的粘附因子和促炎性因子[6,7]，促使动脉硬化。因此，研究内皮细胞老化的复杂调控机制，有效抑制血管内皮细胞的老化，是本次实验的目标。

1.4人脐静脉血管内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells(HUVECs)）

研究人员在做血管内皮细胞的实验时，在一般情况下选用人脐静脉血管内皮细胞作为合适的细胞模型，而不是直接采用动脉血管内皮细胞或者静脉血管内皮细胞。选择人脐静脉内皮细胞的原因是其具有干细胞的潜能，在理论上可以连续传代五十到六十次。通过细胞复苏、细胞接种和培养、消化细胞、细胞传代等一系列步骤，获取细胞进行实验。本次实验研究采用的HUVEC购自美国ScienCell公司，具有高纯度和高活性的优点，目前已作为体外研究的细胞模型，广泛用于研究血管内皮细胞的生理活性如凋亡、血管发生、细胞迁移等，同时也可作为研究内皮病变相关的心血管疾病发病机理的模式细胞。

1.5槲皮素

槲皮素（quercetin）是一种黄酮类的化合物，它的存在十分广泛。在蔬果等植物中,例如槐米、蜂蜜等，槲皮素含量非常丰富,并且槲皮素容易被提取、分离和检测。近年来,国内外医药研究人员对槲皮素作用的研究日益增多,发现其具有很多药理活性。例如，槲皮素具有扩张冠状动脉、降血脂、止血、、抗血小板凝集、抗氧自由基和抗炎[8`10]，以及影响花生四烯酸代谢等作用[11]。除此之外，一氧化氮NO，在血管内皮细胞中作为舒张因子，是生物体内一种活性非常强的自由基团，一氧化氮既有第二信使的作用，又有神经递质的作用，与此同时它又是一种效应分子，在生物体内具有非常广泛的生理活性，例如使血管平滑肌松弛的生理活性，抗血小板聚集的生理活性，调节脑血流的生理活性，介导细胞毒效应以及免疫调节的生理活性，参与学习记忆的生理活性，对于心肌细胞也有保护作用[12]。研究表明，下列几种以血管内皮细胞功能障碍为共同特点的疾病，如糖尿病、冠心病及高血压等疾病患者，其血清中一氧化氮水平明显降低。因为一氧化氮的半衰期非常短，在血液中，一氧化氮主要存在于血管平滑肌细胞、血管内皮细胞、巨噬细胞和血小板中，它们产生硝酸盐以及亚硝酸盐，一氧化氮就以这样的形式存在其中。通过测量硝酸盐以及亚硝酸盐的浓度可以间接测量一氧化氮的浓度。我们使用人脐静脉血内皮细胞，通过体外培养、传代，研究槲皮素对生长状态的血管内皮细胞以及经高糖刺激的内皮细胞的影响，进一步探讨槲皮素对细胞老化作用的机理。