图3 图2 左图为对照组B,右为实验组A 6
表清单
表序号 表名称 页码
表1 葡萄糖的吸光度 5
表2 各样品的吸光值 6
表3 样品的灵芝酸含量 7
表4 各样品对各细胞的抑制率 7
1引言
现如今,中药在被提取药用成分之后,它本身的资源没有全部被开发利用,中药渣常常被看做是废弃物而被扔弃,其中中成药浪费而得药渣量是最高的[1],即使它里面含有大量的活性成分,剩余价值也可以来培育真菌。这样,既可以挖掘出中药的更多的价值,又可以减少因中药渣的丢弃而产生的环境问题。本文研究采用半枝莲作为中药渣的代表来进行试验,是因为半枝莲本身的特性十分有利于灵芝菌的生长,并且半枝莲的提取工作也容易进行。另外,半枝莲类似于草状的形态也不利于处理,易污染环境。
半枝莲,是一种常见的中药,分布广泛,在全国多个地方均有种植,其中,江苏是一处种植的领先地,使得我们对它的研究有着很多的方便之处[2]。。目前为止对于半枝莲的研究很多,主要是采用不同的方式对半枝莲的有效成分进行提取并分析它们属于哪种物质,研究其所带来的可以治疗人体疾病的作用。根据前人的研究发现,半枝莲中含有丰富的黄酮、二萜类物质[3],并且有显著的抗肿瘤、免疫增强、利尿、抗病原微生物及保肝作用等[4-5]。论文网
灵芝菌,用作药物的主要是赤芝和紫芝,全国均有种植,以安徽大别山、江西庐山最为出名。灵芝菌是一种传统的药用真菌,灵芝有延年益寿的奇效,还可以有效地治疗支气管哮喘、降血糖、保肝解毒、抗癌、对抗过敏等[6]。灵芝中多糖和三萜是主要活性成分[7],备受关注,是目前研究的重要内容。灵芝多糖种类丰富,已经提取分析出的大多数以β-(1→3)为主链[8]。灵芝多糖是使得灵芝具有抗肿瘤作用的关键成分[8],它可以通过加强免疫细胞的活力来提高机体的免疫能力。目前从灵芝中分离出来的三萜化合物已有100多种,它的药效作用是多方面的[8],它可以止痛、镇静、增强免疫力、抗过敏、降血压等。此外,微量元素如灵芝硒也逐渐得到人们的研究关注,它具有特别好的抗肿瘤、抑制癌症等作用[9]。
抗肿瘤的效果如何测定?本实验采用Alamar Blue法来测试,可以用于检测细胞的活力。加入Alamar blue溶液后,生长受到影响的细胞会维持原本的蓝色,而正常细胞的细胞颜色会变为赤色,两种颜色相差很大。那么,通过检测这两种颜色的吸光度就可以进行细胞抑制率的计算,从而比较细胞的活性。
本实验利用半枝莲来培养灵芝菌,是想采用生物转化的方法来进行研究。生物转化是一种反应过程,它是通过生物与外源物质相作用,从而使其在结构上发生轻微的改变[10]。它可以进行许多传统化学合成难以完成的反应[11],采用生物转化的方法来研究中药中的化学成分,是一种联合传统中药的优点与当代生物技术的方法[12],可以获得新活性成分来用于新药的开发。目前,常被人们所采用的生物转化研究方法主要有酶发酵技术、组织发酵技术、植物细胞培养、微生物转化技术、双向固体发酵技术。其中,微生物转化技术环保节能、效率高、易操作,使其成为它们之中最受欢迎的一项技术[13]。而且,采用生物转化技术得到的产品,与传统药物相比较,产生的毒副反应要小得多[14],更有利于人们的健康。本文研究采用的即是微生物转化技术,以半枝莲培养灵芝菌,检测培养过程中得到的化合物(主要是多糖和灵芝酸)的含量,论证中药药渣存在丰富的残余价值。