1。2高效毛细管电泳仪的概要
毛细管电泳研究正在向多种前沿领域推广其应用前景,其中在DNA,RNA分析,复杂药物分析,环境分析,医学(代谢组学与临床医学)研究,蛋白质组(多维)分离,糖组分析,手性分离,单细胞分析等方面工作进展较为显著。
与HPLC 相比,CE拥有更高的分辨能力,因其在进样端和检测时均没有像HPLC那样的死体积存在,还有其用电渗作为推动流体前进的驱动力,使溶质区带在毛细管内原则上不会扩散。
1。2。1 HPCE的结构
毛细管电泳系统的基本结构包括进样、填灌/清洗、电流回路、毛细管/温度控制、检测/记录/数据处理等部分,如图1-1所示,可以简化为包含了一段电解质溶液导体的导电回路图1-2。
图1-1毛细管电泳基本结构
图1-2 毛细管电泳的电流回路
在外加电场的作用下,带电的胶体粒子或离子在介质中作定向移动的现象为电泳基本现象,在毛细管电泳(CE)中利用电渗流可将正、负离子和中性分子一起朝一个方向产生差速迁移,在一次CE 操作中同时完成正、负离子的分离测定。由于电渗流的大小和方向可以影响CE 分离的效率、选择性和分离度,所以成为优化分离条件的重要参数。电渗流的细小变化将严重影响CE 分离的重现性(迁移时间和峰面积)。所以,电渗流的控制是CE 中的一项重要任务。
由于样品溶液中各个组分的迁移速率的不同,因此被分离成各个组分然后从毛细管柱中流出,通过检测器,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,所得到的数据结果将以图谱形式打印出。
1。2。2 毛细管的特点及毛细管电泳的优点文献综述
毛细管特点:
容积小,一根100cm*75μm管子的容积仅4。4微升。
侧面/截面积比大,因而散热快,可加高电场(100--1000v/cm)
可使用自由溶液,凝胶等为支持介质
毛细管电泳优点:
高效 自由溶液CE的效率在105-106 理论板之间,理论塔板数非常高。
快速 几十秒至十几分钟完成分离
微量 进样所需体积可小到1微升,消耗体积在1-50nl间
1。2。3 应用范围
目前,CE分析技术被药物分析工作者广泛应用于药物检验领域,药物分析主要分为两块,一方面,原药的定量、原药中杂质的测定、药剂分析以及对它们稳定性的评价等以药品质量管理为目的的测定方法。这些方法要有适当的灵敏度,良好的选择性,可靠的准确度。另一方面,对进入人体内的药物或代谢物的吸收、分布、代谢、排泄等体内动态的研究,即临床药物分析。这两部分的测定一般需要分离和检测相互结合才可以实现。
主要应用范围
(1)CE在药物制剂分析中的应用
在药物制剂分析中,一般会含有复杂的基体,而采用CE法可以有效排除高含量复杂基体的干扰,分离检测痕量组分的能力。且样品只需简单的前处理工序就可以检测有效成分的含量。
(2)CE在药物杂质检测中的应用
药物合成过程中带入的杂质和药物的降解产物通常会与药物具有相似的结构,而且含量一般较低,CE法作为药物杂质痕量组分分析的方法,具有检测灵敏度高,选择性强的特点,还具有多组分,低含量,及其同时检测的能力。来;自]优Y尔E论L文W网www.youerw.com +QQ752018766-
(3)CE在中药分析检测中的应用
中药品种繁多,药材产地各异,成分较为复杂,因此无论是中药材还是中成药的分析,都是一项非常艰难的任务。随着CE技术的发展,其对中药材和有效成分的鉴别和分析也步上了一个新的台阶。毛细管电泳法越来越多的应用于中药材有效成分的分离和检测之中。