2。实验方法及材料

    2。1感音神经性耳聋动物模型的建立

  2。1。1实验动物及分组

健康CBA/caj小鼠60只，雄性，随机分成6 组并编号：正常组（空白对照）、给硫酸卡那霉素与速尿联合用药后1d组、给药后3d组、给药后7d组、给药后14d组、给药后28d组。每组10 只，适应性饲养一周，正常光照和进食。文献综述

  2。1。2 动物用药

正常组小鼠不进行任何处理（不注射任何药物）。药物耳聋模型组小鼠建立药物耳聋模型，皮下注射硫酸卡那霉素（按1mg/g的量进行注射），半小时后腹腔注射呋塞米（速尿按0。5mg/g的量进行注射），给药后仍正常饲养。

    2。2 感音神经性耳聋动物模型的鉴定

    2。2。1 听性脑干反应测试（auditory brainstem response，ABR）

各组小鼠于用药后1天、3天、 7天、14天、28天分别麻醉各组小鼠，取5%的水合氯醛按0。01ml/g 腹腔注射进行麻醉，5-10min 后，观察小鼠的刺痛反射消失，呼吸减弱，依此判断麻醉适宜即可开始实验。麻醉后的小鼠采取俯卧位固定于隔声室内的实验台上进行ABR检测。

使用美国 TDT系统Ⅲ （Tucker-Davis-technologies System Ⅲ），在隔声屏蔽室内行双侧 ABR 阈值测试，测量电极插于检测方耳乳突处皮下，记录电极插于两耳中间颅顶处皮下，接地电极插于检测耳的对侧耳乳突处皮下，要求极间阻抗小于<5 kΩ，各检测电极针尖部留出10mm 刺入小鼠皮下。选择合适耳塞，将耳机放置于小鼠检测耳的外耳道10cm处，刺激声为交替短声，重复率21。1counts/s，记录分析时间为15 ms，叠加次数为1024，带通滤波为100～3000 Hz。刺激声起始强度90dBnHL，以5dBnHL 递减以引出Ⅱ波的最小刺激强度确定为阈值。记录各组小鼠ABR 阈值。