2 材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1药品及试剂
BDE-47(纯度>98%,购自Chem Service),玉米油(购自Sigma-Aldrich),曲克芦丁(纯度>99%,购自宝鸡方晟生物开发有限公司),兔抗NAMPT抗体, 兔抗 PARP1抗体 (购自Santa Cruz Biotechnology),PARP1活性检测试剂盒(购自Trevigen Inc.),EnzyChromPTMP NADP+P/NADH检测试剂盒(购自BioAssay Systems),20× LumiGLO® 反应液及20× Peroxide (购自cell signalling)。
2.1.2实验动物
选购国家啮齿类实验动物育种中心分公司(上海,中国)的雄性ICR小鼠源!自`优尔'文"论(文`网[www.youerw.com,年龄为8周龄,其体重在31±2g的范围内。设置恒温温度在23°C±1°C的范围内,控制空气湿度为60%,将小鼠置于其中喂养、生活。在08:30–20:30的时间段里将小鼠进行光照,其余时间进行暗处理。一周后,把小鼠随机地分成4组,每组6只小鼠,每组小鼠连续喂养12周,进行以下处理:
control组:每日灌胃玉米油以及0.1% Tween-80;
BDE-47组:每日灌胃BDE-47,剂量为150mg/kg/d;
BDE-47+troxerutin组:每日灌胃BDE-47,剂量为150mg/kg/d;每日灌胃150mg/kg/d的曲克芦丁;
troxerutin组:每日灌胃曲克芦丁,剂量为150mg/kg/d。
2.2实验仪器
荧光显微镜(德国Zeiss,型号Axioskop 40),冷冻台式高速离心机(德国Eppendorf公司生产,型号为5810R),紫外-可见分光光度计(日本岛津公司生产,型号UV-2501 PC ),水平电泳槽 (北京六一仪器厂,型号DYCP-31B),蛋白转印电泳系统(美国BIO-RAD公司),凝胶成像系统(美国伯乐公司生产,型号Universal Hood II),SpectraMax M2多功能酶标仪 (美国Molecular Devices公司),恒温金属浴(杭州大和热磁电子有限公司生产,型号FeroTec HB100),高速匀浆器(德国IKA公司,型号T10 basic)。
曲克芦丁保护BDE-47诱导的小鼠肝脏NAD+耗竭(3):http://www.youerw.com/yixue/lunwen_54077.html