2.2实验试剂

BDE-47(纯度>98%，购自Chem Service)，曲克芦丁(纯度>99%，购自宝鸡方晟生物开发有限公司，ALT（购自南京建成生物工程研究所），玉米油(购自Sigma-Aldrich)，Caspase-3酶活检测试剂盒(购自Calbiochem)，DCFH-DA(购自Sigma-Aldrich)，兔抗p-PERK (Thr980)抗体, 兔抗p-eIF2α(Ser51) 抗体,GADD34抗体 (购自Santa Cruz Biotechnology)，兔抗cleaved-Caspase-3抗体 (购自Cell Signaling Technology, Inc)，鼠抗Bax抗体，鼠抗Bcl-2抗体(购自BD Biosciences)，鼠抗β-actin 抗体 (购自Chemicon International Inc),  20× LumiGLO® 反应液及20× Peroxide (购自cell signalling)。

2.3实验仪器

恒温金属浴(杭州大和热磁电子有限公司，型号为FeroTec HB100)，冷冻台式高速离心机(德国Eppendorf公司生产,型号为5810R)，紫外-可见分光光度计(日本岛津公司生产，型号UV-2501 PC )，凝胶成像系统(美国伯乐公司生产，型号Universal Hood II)，水平电泳槽 (北京六一仪器厂，型号DYCP-31B)，蛋白转印电泳系统(美国BIO-RAD公司)，高速匀浆器(德国IKA公司，型号T10 basic)，SpectraMax M2多功能酶标仪 (美国Molecular Devices公司)。

2.4 实验方法

（1）建立BDE-47诱导的小鼠肝脏损伤模型；（2）小鼠氧化应激相关指标检测：源!自`优尔'文"论(文`网[www.youerw.com获取小鼠肝脏组织及血清、制备组织匀浆液，储存在-70℃下。匀浆离心10分钟，取上清液测定活性氧ROS。（3）小鼠肝脏内质网应激指标检测：以Western blot法测定肝组织内提取的各物质并检测并进行分析。（4）小鼠肝脏细胞凋亡相关蛋白检测。 

2.4.1血清制备及组织匀浆

将小鼠麻醉、处死，获取小鼠肝脏及血浆组织并称重，保存在-80°C 冰箱中冷冻1h，以3,000的转速离心5分钟获得血清。加入5倍体积(相比肝脏组织块重量)的预冷PBS液(含蛋白酶抑制剂)，剪碎，再用组织捣碎机将其研磨成肝脏组织匀浆液。再以12,000g，4℃条件离心10min取上清。

2.4.2ALT的测定

ALT的活性表示为U/L，用分光光度法测定血清ALT水平，测定方法参照试剂盒说明书（建成生物技术研究所，南京，中国）。