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利拉鲁肽的全合成方法研究(2)

时间:2021-12-16 17:28来源:毕业论文
准确称量0。262g Rink树脂放入合成管中,先用二氯甲烷洗一次,甲醇洗一次,再用二氯甲烷洗三次,最后用二氯甲烷浸泡20分钟,浸泡结束后用DMF清洗两次,

准确称量0。262g Rink树脂放入合成管中,先用二氯甲烷洗一次,甲醇洗一次,再用二氯甲烷洗三次,最后用二氯甲烷浸泡20分钟,浸泡结束后用DMF清洗两次,完成后滤去溶液。

2。3。1。2茚三酮检测方法

检测试剂1:称取0。5g的三酮溶解于10 mL的乙醇中;

检测试剂2:称取80 mg的苯酚溶解于20mL的乙醇中;

检测试剂3:吡啶溶液。

取少量反应结束的树脂,放于离心管中,分别加入以上三种试剂,各加2-3滴,在100℃的条件下加热5分钟,结束后,若树脂呈浅黄色时表明反应未完全,若树脂呈蓝色时表明反应完全。

2。3。1。3脱除 Fmoc保护基

溶胀后的树脂在合成管中,加7 mL的20%哌啶/DMF溶液,在室温条件下反应30分钟,完成后除去溶液,用N,N-二甲基甲酰胺(DMF)洗两次,即得脱除Fmoc保护基的Rink树脂。

2。3。1。4氨基酸与树脂链接文献综述

His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly

称取0。18 g Fmoc-Gly-OH放入离心管中,先加入3 mL的DMF溶解,溶解后依次加入1。2 mL的HBTU/HOBT溶液和0。6 mL的DIEA溶液,混匀。将混匀后的溶液加入存有脱去Fmoc保护基的Rink树脂的合成管中,在25℃条件下耦合2小时。完成后滤去反应液,用7 mL N,N-二甲基甲酰胺洗一次,再用7 mL的20%哌啶/DMF溶液洗一次,最后用7 mL N,N-二甲基甲酰胺洗两次,滤去溶液,真空干燥树脂,用茚三酮法检测,树脂呈浅黄色,耦合完全。

称取0。39g Fmoc-Arg-OH放入离心管中,先加入3 mL的DMF溶解,溶解后依次加入1。2 mL的HBTU/HOBT溶液和0。6 mL的DIEA溶液,混匀。将混匀后的溶液加入上面得到的树脂中,在25℃条件下耦合2小时。完成后滤去反应液,用7 mL N,N-二甲基甲酰胺洗一次,再用7 mL的20%哌啶/DMF溶液洗一次,最后用7 mL N,N-二甲基甲酰胺洗两次,滤去溶液,真空干燥树脂,用茚三酮法检测,树脂呈蓝色,反应未完全。再次称量0。21g Fmoc-Ile-OH放入离心管中,先加入3 mL的NMP溶解,溶解后依次加入1。2 mL的HBTU/HOBT溶液和0。6 mL的DIEA溶液,混匀。将混匀后的溶液加入上面得到的树脂中,在25℃条件下耦合1小时。完成后滤去反应液,用7 mL N,N-二甲基甲酰胺洗一次,再用7 mL的20%哌啶/DMF溶液洗一次,最后用7 mL N,N-二甲基甲酰胺洗两次,滤去溶液,真空干燥树脂,用茚三酮法检测,树脂呈浅黄色,耦合完全。来*自~优|尔^论:文+网www.youerw.com +QQ752018766*

称取0。18g Fmoc-Gly-OH放入离心管中,先加入3 mL的DMF溶解,溶解后依次加入1。2 mL的HBTU/HOBT溶液和0。6 mL的DIEA溶液,混匀。将混匀后的溶液加入上面得到的树脂中,在25℃条件下耦合2小时。完成后滤去反应液,用7 mL N,N-二甲基甲酰胺洗一次,再用7 mL的20%哌啶/DMF溶液洗一次,最后用7 mL N,N-二甲基甲酰胺洗两次,滤去溶液,真空干燥树脂,用茚三酮法检测,树脂呈浅黄色,耦合完全。

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