1。1。4固定化酶在临床医疗中的应用

在医疗上酶的应用叫酶疗法。但酶本身是一种蛋白质，作为治疗目的进入人体后，会产生抗体，可能导致患者的过敏性休克。另外，酶作药物使用活性都比较低，蛋白酶也不太能够水解它们，因此会失去治疗作用。L-天门冬酸酰胺酶在临床上对治疗急性淋巴细胞白血病和非何杰淋巴瘤有较好的疗效，但天然L-天门冬酸胺酶有很严重的毒副作用，会出现抗原-抗体反应，使病人出现休克。因此，L-ASP被装填于柱中或将其固定在酶板、酶管或血液透析膜上，使血液从固定化酶上流过，除去癌细胞生长所需的天门冬酰胺而达到治疗目的[7]。固定化后的L-天门冬酸酰胺酶不仅依然有活性，而且稳定性也大大提高。

另外，微囊固定化过氧化氢酶在临床检测及卫生防疫方面也具有广泛用途，因为其具有良好的活性及稳定性。由此可见固定化酶在医学领域应用已经较为广泛，相信随着研究的更深入，固定化酶会为医学领域注入更多的活力。

1。1。5固定化酶在农残检测上的应用

在农业的高生产率中，农药因其能对昆虫控制，发挥着很重要的作用。然而，食品、水还有环境中存在的农药残留已经变成了环境化学的一个主要的问题。如含有机磷的杀虫剂在环境中长期积累，它们对于乙酰胆碱酯酶，一种在人类中枢神经系统中有关键功能的酶具有高毒性（乙酰胆碱作为乙酰胆碱酯酶的底物可以被其催化水解,有机磷能抑制乙酰胆碱酯酶的催化活性），这会对人类的健康产生巨大的影响。因此就有了相关的生物传感器被制作出来,将它们用在一些农药当中有机磷的含量、底物的含量以及酶活性等方面的测定[8]，事实结果表明其效果很好。另外，还有实验用基于乙酰胆碱酯酶（AchE）在多壁碳纳米管/石墨烯氧化物纳米带（MWCNTs / GONR）纳米结构上的共价固定来检测甲氰菊酯农药[9]。可以说，乙酰胆碱酯酶在农药检测方面很重大的意义。

1。2乙酰胆碱酯酶

基本所有动物体内都含有乙酰胆碱酯酶(AchE)，它在动物神经系统中水解神经递质乙酰胆碱，使乙酰胆碱对突触后膜不发生兴奋和刺激，这样能确保神经信号在神经系统中能正常地进行传导。乙酰胆碱酯酶更是一种重要的工具酶，它在环保、医学、农业、军事等领域都具有重要用途。例如，乙酰胆碱酯酶能与有机磷、氨基甲酸酯结合，当有机磷与氨基甲酸酯与AchE相结合以后，会使得乙酰胆碱不能与乙酰胆碱酯酶进行结合，从而乙酰胆碱对突触后膜始终产生刺激和兴奋，若一种生物长期处于神经兴奋状态，会导致精神衰弱甚至最终死亡[10]。论文网

若乙酰胆碱酯酶单纯以游离的形式存在很不稳定，非常容易就失去活性，而且还不能重复利用，由此可见只有固定化乙酰胆碱酯酶才能使其发挥更大作用。

乙酰胆碱酯酶固定化指的就是利用一些物理或化学方法将乙酰胆碱酯酶固定在相应的载体上。固定化后的乙酰胆碱酯酶与游离酶相比，有更稳定，可重复利用，重现性好等很多优点。所以目前有众多关于固定化酶的研究，以下将介绍的是乙酰胆碱酯酶的几种固定化方式。

1。3乙酰胆碱酯酶固定化

为了维持酶的原本的性质，必须选择一种有效的固定化乙酰胆碱酯酶方法。一般大家都了解的固定化酶方法有以下几种。

首先要介绍的是吸附法。吸附法的条件温和，对固定化酶的活性影响很小，基本不会改变固定化后酶的构象。但当遇到不同pH 、高盐浓度或者高温等条件下，因为固定化的固定效果不强,固定化的酶很容易与载体分离。物理吸附作用包括乙酰胆碱酯酶到修饰电极的表面的沉积、通过如范德华力等弱键的连接以及乙酰胆碱酯酶与修饰电极之间的静电相互作用。这种方法已经被广泛认为是最简单、最有保障的策略。它不涉及任何电极材料功能的改变或是共价链接。这个技术已经成功地用于固定乙酰胆碱酯酶到网丝印刷石墨表面的一次性电极上。有研究团队使用了一系列合适的洗涤缓冲液冲洗电极，去除表面上还有过多吸附的酶，在这个系统中，电极在八个连续试验中都很稳定，在真空中储存了五十天以后，电极仍然具有原来的活性[11]。 乙酰胆碱酯酶的分子模拟及其固定化研究热稳定性研究(4):http://www.youerw.com/yixue/lunwen_89070.html