3。1。2 固定化酶扫面电镜分析 19

3。1。3小结 21

3。2纳米粒子固定化酶最佳固载条件 21

3。2。1 固定化酶的表征 21

3。2。2  Langmuir和Freundlich吸附等温线 22

3。2。3小结 24

3。3 纳米粒子固定化酶用于异槲皮苷的酶促定向工艺 24

3。3。1芦丁和异槲皮苷HPLC和LC-MS分析 24

3。3。2 芦丁和异槲皮苷的标准曲线 25

3。3。3 pH对异槲皮苷得率的影响 27

3。3。4 单因素对酶促芦丁水解制备异槲皮苷的影响 28

3。3。5石墨烯固定化酶常规反应器中的重复利用 31

3。3。5 常规反应器的动力学 32

3。3。6小结 34

3。4纳米粒子固定化酶在微通道反应器中合成异槲皮苷 34

3。4。1底物浓度 34

3。4。2温度 35

3。4。3流速 36

3。4。4表面活性剂 37

3。4。4石墨烯固定化酶微反应器中的重复利用 38

3。4。5小结 39

结 论 40

致 谢 41

参考文献 42

第一章 绪论

1。1 异槲皮苷

异槲皮苷类属于黄酮类化合物，也被称为槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷，是由槲皮素和葡萄糖所形成的糖苷。异槲皮苷的分子量是464。38。是黄色针状结晶，在自然界物种中的含量稀少。

1。1。1 异槲皮苷的药效文献综述

异槲皮苷具有抗氧化、抗炎、抗抑郁、降压、降脂、降酶、抗诱变和抗病毒等多种药理作用，并且在制备治疗心肌缺氧、脑缺氧、缺血性疾病以及抗血栓药物中作为有效成分，而备受重视。Gasparotto等[1]报道过异槲皮苷能够抑制血管紧张，起到抗高血压的作用，并且具有利尿和保钾的功效。此外，Arung等[2]发现异槲皮苷也具有抗黑色素生成的功能。

异槲皮苷经常被用作辅助药物或者药物的有效成分被用来给药，其相关制剂开发前景广大，并有希望成为有利于人体健康的小分子临床药物。此外，异槲皮苷还是新的多用途食品着色剂Enzymatically modified isoquercitrin（EMIQ）的中间体（常见制备方法如图1。1），已获得美国食品药品监督管理局（Food and Drug Administration，FDA）的安全认证[3]。

图1。1异槲皮苷制备EMIQ[4]

Figure 1。1 EMIQ preparation with isoquercitrin

1。1。2 异槲皮苷的来源

异槲皮苷在自然界的植物中分布很广，如在桑叶、田基黄、罗布麻等作物中都含有，但含量低，只有万分之几，有的甚至就只有十几万分之一，这就增加了从植物中提取制备异槲皮苷的难度，而化学合成的成本高，因此导致异槲皮苷的价格非常昂贵，阻碍了异槲皮苷在市场上的推广。

1。1。3 异槲皮苷的生物合成

芦丁（Rutin，也称芸香苷），是维生素P的主要成分之一，化学名称为5, 7, 3’, 4’-4-OH-3-O-鼠李糖基-葡萄糖基-黄酮。芦丁分子式为C27H30O16·3H2O，分子量为610。51，其性状为黄色结晶粉末或无晶形粉末，味微苦，熔点177 ～ 178 ℃， 略溶于水， 能溶于热水及乙醇。芦丁遇光易变质，需在阴凉处保存。在20世纪30年代中期匈牙利科学家Szent [5]分离出类黄酮混合物，1942 年德国药学家首次制成芸香苷之后，世界上确立了维生素P的概念，在此后的进一步研究中发现了维生素P中的一种最重要的黄酮类物质，即“芦丁”。该类化合物在医学界已得到证明，有不可多得的治病防病作用。芦丁广泛存在于自然界中，几乎所有的芸香科和石楠科植物中均含有，尤以芸香科的芸香草、豆科的槐米、蓼科的荞麦、金丝桃科红旱莲、鼠李科光枝勾儿茶以及大蓟科野梧桐叶含量较为丰富，可以作为提取芦丁的原料。此外，它还存在于冬青科毛冬青、木樨科连翘、豆科槐角以及烟草、枣、杏、皮和番茄等植物中，有待于进一步研究。 纳米粒子固定化酶转化芦丁制备异槲皮苷的研究(3):http://www.youerw.com/yixue/lunwen_94051.html