YC    68.80    18.20    13.00    8.60    0.58    0.101    755

1.2试剂与仪器
试剂    纯度    厂家
丙酮    分析纯    上海凌峰化学试剂有限公司
石油醚    分析纯    上海凌峰化学试剂有限公司
甲醇    色谱纯    ROE SCIENTIFIC. INC
浓硫酸    分析纯    南京化学试剂厂
氢氧化钠    分析纯    南京化学试剂厂
硫酸钾    分析纯    西陇化工股份有限公司
氯仿    分析纯    上海凌峰化学试剂有限公司
焦磷酸钠    分析纯    南京化学试剂厂
高锰酸钾    分析纯    南京化学试剂厂
硫酸锰    分析纯    南京化学试剂厂
扑灭津    97%    南通先正达公司

仪器型号    型号    生产厂家
高效液相色谱    515 HPLC Pump
2489 UV/Visible Detector    Waters（美国）
土壤总有机碳测定仪    SSM-5000A    岛津
台式低速离心机    TD5A-WS    湘仪离心机
数控摇床    SI-300R    Lab. Companion
超声波清洗仪    KH-500    昆山禾创超声仪有限公司
旋转蒸发仪    R-114A29 B-408    Buchi Labortechnik AG
恒温培养箱    Pax-250B    宁波海曙赛福实验仪器
紫外可见分光光度计    Alpha-1506    上海谱元仪器有限公司
分析天平    BS224S    Sartorius
恒温振荡器    IS-RDD3    美国精骐
立式压力蒸汽灭菌器    LDZX-50KBS    上海申安医疗器械厂
pH计    DELTA320    METTLER TOLEDO
1.3 培养基
无机盐MSM培养基：氯化钠：0.5 g，磷酸氢二钾：0.75 g，磷酸二氢钾0.25 g， 无水硫酸镁：0.04878g，硝酸铵：0.5 g，用去离子水定容至500 mL，pH值为7.5，120℃高温灭菌备用。
MP培养基为MSM培养基中添加除草剂扑灭津至一定浓度，120℃高温灭菌备用。
固体培养基于无机盐培养基中加入0.5 %的琼脂，120℃高温灭菌备用。
1.4 菌株的筛选、培养和降解动力学
1.4.1 降解菌富集液的制备
取采集回来的南京3种不同土壤1.0 g，分别添加于50 mL的MP培养基中，每个样品设置三个平行，培养基的浓度为10 mg L-1，放于恒温振荡器中，35℃，180 r min-1 振荡培养。之后每7天进行一次转接，及以5 % 的接种量接到新配制的MP培养基中，每7天提高一次培养基中扑灭津的浓度直至60 mg L-1，如此培养1-2个月，同时对接种了不同土壤的培养基中扑灭津的浓度进行测定，对扑灭津有降解效果（降解率> 50 %）的样品被挑选出来，监测农药降解行为以及菌的生长情况。
1.4.2 无机盐MSM培养基中扑灭津检测方法的建立
扑灭津在无机盐MSM培养基中的前处理方法的建立：量取50 mL配置好的MSM培养基，向其中加入5、50、300 μL的扑灭津标准溶液（10 g L-1），振荡均匀，使其在培养基中的浓度分别为1、10和60 mg L-1，每个样品设置三个平行。将配置好的加标后的培养基溶液用石油醚进行液液萃取，每次使用石油醚15 mL，取上层有机相，重复此操作四次，有机相合并后在40 ℃旋转浓缩至干。用色谱甲醇10 mL 定容，超声30 s后用针管吸取1mL过0.45 μm滤膜，待进高效液相色谱测定（高浓度组需要色谱甲醇逐级稀释后进样）。高效液相色谱检测条件：色谱柱：C18反相柱（Thermo, 250 mm×4.6 mm i.d.），进样温度：25 ℃，流动相：甲醇：水 = 75:25（V/V），流动相流速：0.6 mL min-1，UV紫外检测器检测，检测波长：230 nm，进样量：20 μL。 三嗪类除草剂降解菌的分离及降解行为研究(3):http://www.youerw.com/huaxue/lunwen_19407.html