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1。4。3加拿大一枝黄花组织总多酚的抗氧化性研究

通过实验测定加拿大一枝黄花组织总多酚浸提液对DPPH自由基、羟基自由基、过氧化氢的清除率、对卵黄脂质过氧化的抑制率以及多酚浸提液的还原能力，并以同浓度的VC作为对照，以此来研究加拿大一枝黄花组织总多酚的抗氧化活性。结果为，多酚浸提液清除DPPH自由基的能力不如同浓度VC，约为同浓度VC的1/2。多酚浸提液清除羟基自由基能力约为同浓度VC的4。85倍。多酚浸提液抗脂质过氧化能力、还原能力远强于同浓度VC。

1。5拓展研究

酚类物质易溶于甲醇、乙醇、乙醚等有机溶剂，不同的提取剂对于加拿大一枝黄花组织总多酚的提取有影响。并且，料液比、超声时间、提取次数等因素对于提取率均有影响。因此，进行单因素实验和正交试验来优化提取方法，从而确定最优的提取方法。运用大孔吸附树脂进一步纯化加拿大一枝黄花组织总多酚，研究其化学成分及有效成分，为开发加拿大一枝黄花的药用价值提供参考。

第二章 材料与方法

2。1 实验材料与试剂

2。1。1 实验材料

加拿大一枝黄花采于江苏镇江润州区南徐大道旁和五洲山附近。

2。1。2 实验试剂

D101、AB-8、NKA-Ⅱ型大孔吸附树脂购自天津南开树脂科技有限公司。

焦性没食子酸、乙醇、VC、硫酸亚铁、酒石酸亚铁、双氧水、水杨酸、三氯乙酸、氯化铁、铁氰化钾、硫代巴比妥酸、邻苯三酚、三氯乙酸、HCl、NaOH。所有试剂均为分析纯，购自国药化学试剂有限公司。来.自^优+尔-论,文:网www.youerw.com +QQ752018766-

2。1。3 试剂的配制

pH=7。5磷酸盐缓冲液: 配制1/15mol/L磷酸氢二钠溶液为A液和1/15mol/L磷酸二氢钾溶液为B液，按A液：B液体积比为17:3配成pH=7。5磷酸盐缓冲溶液。

１:２５卵黄悬液：将新鲜鸡蛋打碎、去皮，放到培养皿中，用干净的注射器吸取5mL卵黄于试管中，再用注射器吸取5mL pH为7。4的0。1mol/L的磷酸盐缓冲液与卵黄混合，接着用保鲜膜把试管密封好，用力的摇晃10min，取1mL该混合液于25mL容量瓶中，再向其中加上述磷酸盐缓冲液定容至25mL，放在冰箱中冷藏备用。

0。04 mg/mL DPPH溶液：准确称量DPPH·试剂10 mg，用95%的乙醇溶解并定容到250 mL容量瓶中，充分摇匀得DPPH储备液，置于冰箱中备用。用pH=7。4磷酸缓冲液配制10mmol/L双氧水。

0。05mmol/L Tris-HCl缓冲液：称取1。21g三羟甲基氨基甲烷，用蒸馏水溶解定容至100mL，使其完全溶解，取50mL上述溶液于100mL容量瓶中，再加23mL HＣl，用蒸馏水定容。